¿Qué es Endotoxin?
La prueba de endotoxinas mide la cantidad de lipopolisacárido (endotoxina) que se origina en la pared celular de las bacterias Gram negativas. La endotoxina es resistente al calor: la esterilización mata la bacteria pero no destruye la endotoxina. Por lo tanto, un producto estéril puede seguir siendo pirógeno y debe probarse por separado.
Objetivo de Endotoxin
El objetivo es demostrar que el nivel de endotoxinas en los dispositivos que entran en contacto con el cuerpo a través del torrente sanguíneo, el líquido cefalorraquídeo o la implantación está por debajo del límite permitido.
¿A qué productos se aplica Endotoxin?
- Catéteres intravenosos y equipos de infusión.
- Implantes
- Equipos de diálisis
- Instrumentos y sets quirúrgicos.
- Dispositivos en contacto con líquido cefalorraquídeo.
¿En qué sectores se utiliza Endotoxin?
Normas relacionadas con Endotoxin
- PE 2.6.14
- USP <85>
- ANSI/AAMI ST72
- ISO 11737-3
- ISO 11607embalaje de barrera estéril del producto final prueba
Condiciones de Endotoxin
- Método
- Métodos LAL de gel-coagul, turbidimétrico o cromogénico
- Extracción
- Las superficies de contacto del producto con el cuerpo se extraen con agua libre de endotoxinas.
- Control de interferencias
- Se debe verificar que el producto no inhiba ni mejore la prueba.
Equipo para Endotoxin
- Kits de prueba y reactivos LAL
- Cristalería libre de endotoxinas
- Lector de microplacas (para métodos cinéticos)
- Horno de calor seco (para despirogenación)
- Incubadora con temperatura controlada
Requisitos de muestra para Endotoxin
- El producto final esterilizado.
- Se debe conocer la superficie de contacto con el cuerpo.
- El número de muestras se determina según la farmacopea y la información del lote.
- La muestra debe prepararse y transportarse en contenedores libres de endotoxinas.
Duración de Endotoxin
La prueba inicial, incluido el estudio de interferencia (inhibición/mejora), lleva varios días; Las pruebas de rutina son más cortas.
Procedimiento de Endotoxin
- 1Se calcula el límite de endotoxinas para el producto.
- 2Se realiza un estudio de interferencias o se hace referencia a un estudio existente.
- 3El producto se extrae con agua libre de endotoxinas.
- 4El extracto se mezcla con el reactivo LAL.
- 5Se incuba a la temperatura definida.
- 6Según el método, se mide la formación de coágulos, la turbidez o el desarrollo del color.
- 7La cantidad de endotoxina se calcula a partir de la curva estándar.
Criterios de aceptación de Endotoxin
El criterio de aceptación es el límite de endotoxinas calculado para el producto. Este límite se calcula mediante la fórmula definida en la farmacopea, en función de la vía de contacto del dispositivo y del peso del paciente; el límite es notablemente inferior para los dispositivos que están en contacto con el líquido cefalorraquídeo.
Evaluación de resultados
El resultado se compara con el límite calculado. Si el estudio de interferencia no es válido, el resultado no se puede interpretar; cuando el producto suprime la reacción LAL, se debe determinar un factor de dilución.
Informe de Endotoxin
- Farmacopea aplicada y método.
- Descripción de la muestra, lote y superficie.
- Límite de endotoxinas calculado
- Resultado del estudio de interferencia y factor de dilución.
- Valor de endotoxina medido (UE/dispositivo o UE/mL)
- Comparación con el límite
Acreditación
EUROLAB posee una acreditación reconocida internacionalmente obtenida de organismos de acreditación que forman parte de los acuerdos de reconocimiento multilateral de IAF e ILAC, según ISO/IEC 17025 para pruebas de laboratorio, ISO/IEC 17020 para inspección y vigilancia, e ISO/IEC 17021-1 e ISO/IEC 17065 para certificación de sistemas y productos. Esta cadena garantiza que los informes y certificados emitidos sean aceptados en todo el mundo.
La posibilidad de ofrecer esta prueba dentro del alcance acreditado depende de su producto y del estándar aplicado; Dado que la acreditación se basa en métodos, el alcance se confirma por escrito en la etapa de cotización.
Alcance y autorizacionesRegulaciones Relacionadas
- MDR (UE) 2017/745
- Requisitos de la farmacopea
Medikal Cihaz Testleri — ¿Qué abarca este campo de ensayo?
La siguiente sección describe el campo al que pertenece el ensayo Endotoxin; las condiciones y criterios de aceptación de este ensayo en particular figuran en las secciones anteriores. El alcance específico de su producto se confirma por escrito en la etapa de cotización.
Los ensayos de dispositivos médicos demuestran que un dispositivo es seguro para el paciente y el usuario y que mantiene su rendimiento previsto. En este ámbito la seguridad no consiste solo en evitar daños; que el dispositivo no cumpla su función esperada también se trata como un riesgo. Que un monitor no emita una alarma o que una bomba administre una dosis incorrecta es directamente un evento de seguridad del paciente.
En el centro del ámbito está la GESTIÓN DE RIESGOS, y esto es lo que distingue lo médico de otros sectores. El proceso de gestión de riesgos llevado a cabo conforme a la ISO 14971 también determina qué ensayos se requieren. La lista de ensayos no se copia de una tabla de normas; se deriva y justifica a partir del uso previsto del dispositivo, la naturaleza y duración del contacto con el paciente, el entorno de uso y el mal uso previsible.
La evaluación consta de varios ámbitos de trabajo separados, cada uno con su propio conjunto de normas. La biocompatibilidad se rige por la serie ISO 10993, la seguridad eléctrica del dispositivo por la serie IEC 60601, la esterilización por ISO 11135/11137/17665, el envasado por ISO 11607, el software por IEC 62304 y la usabilidad por IEC 62366. El sistema de calidad (ISO 13485) es el marco que une todo esto.
Los ensayos requeridos vienen determinados por la CLASE del dispositivo y su MODO DE CONTACTO CON EL CUERPO. Un producto en contacto breve con la piel y un implante que entra en el torrente sanguíneo no siguen el mismo conjunto de ensayos; el alcance lo fija un plan de evaluación biológica preparado conforme a la ISO 10993-1. Ese plan justifica por escrito qué criterios de valoración se requieren y por qué los demás no.
El envase y la esterilización se toman tan en serio como el propio dispositivo en este ámbito. En un dispositivo estéril, el envase no es un contenedor de transporte sino la barrera que mantiene la esterilidad; si la barrera se rompe, el dispositivo deja de ser estéril. Por ello, los procesos de envasado se validan y la vida útil se respalda con datos de envejecimiento en tiempo real.
En los dispositivos que contienen software, la evaluación pasa de los ensayos al aseguramiento del PROCESO. La IEC 62304 define qué pasos de desarrollo y verificación deben seguirse según la clase de seguridad del software; la evidencia es la trazabilidad del proceso de desarrollo. No es probar el software lo que lo hace seguro, sino el registro del proceso.
El lado clínico es una columna separada del expediente técnico. Los informes de ensayo muestran que el dispositivo es técnicamente seguro; la evaluación clínica establece que el dispositivo aporta el beneficio clínico previsto y que la relación beneficio-riesgo es aceptable. Ninguno sustituye al otro.
Grupos de métodos en este campo
Biocompatibilidad
Citotoxicidad, irritación, sensibilización cutánea, toxicidad sistémica, hemocompatibilidad, genotoxicidad y efectos locales tras la implantación. Los criterios requeridos los fija el plan ISO 10993-1.
Seguridad de dispositivos eléctricos
IEC 60601-1 seguridad básica y funcionamiento esencial; requisitos de CEM, alarma, usabilidad y ambientales mediante las normas colaterales.
Validación de la esterilización
Validación de procesos de esterilización por óxido de etileno, radiación o calor húmedo; estudios de biocarga y nivel de garantía de esterilidad.
Embalaje
Integridad del sistema de barrera estéril, resistencia del sellado, simulación de distribución y estudios de vida útil.
Ensayos microbiológicos
Determinación de biocarga, ensayo de esterilidad, endotoxina bacteriana y, si se requiere, estudios de validación del portador.
Software y usabilidad
Evidencia del ciclo de vida IEC 62304 y evaluación centrada en errores de uso según IEC 62366.
Confusiones frecuentes en este campo
- La citotoxicidad por sí sola no es prueba de biocompatibilidad; el conjunto requerido de puntos finales se determina y justifica de acuerdo con la norma ISO 10993-1.
- Un certificado ISO 13485 no otorga el marcado CE; la clasificación bajo el MDR, el expediente técnico y el proceso del organismo notificado son independientes.
- El envejecimiento acelerado no reemplaza el envejecimiento en tiempo real; una afirmación de vida útil está respaldada por datos en tiempo real.
- Un cambio de material (proveedor, pigmento, método de esterilización) puede requerir repetir la evaluación biológica; no es un cambio silencioso.
- Una evaluación realizada sin las normas colaterales y particulares de la IEC 60601-1 está incompleta; qué normas -1-x y -2-x se aplicaron debe figurar en el informe.
- Los dispositivos de diagnóstico in vitro se rigen por el IVDR y no por el MDR, y el equipo de laboratorio suele estar en el ámbito de la IEC 61010-1.
Qué decisiones respaldan estos resultados
- Expediente técnico MDR/IVDR y evaluación por el organismo notificado
- Finalización del plan de evaluación biológica
- Validación de esterilización y envasado
- Determinación de la vida útil y las condiciones de almacenamiento
- Determinación del alcance de la reevaluación tras un cambio de diseño
Pruebas relacionadas
Preguntas frecuentes sobre Endotoxin
Mi producto es estéril. ¿Por qué es necesaria una prueba de endotoxinas?
La endotoxina es resistente al calor; aunque la esterilización mata la bacteria, no descompone la endotoxina, que es un residuo de la pared celular. Por lo tanto, un producto estéril aún puede provocar una reacción pirógena y las endotoxinas deben medirse por separado.
¿Cómo se determina el límite de endotoxinas?
Se calcula mediante la fórmula definida en la farmacopea, en función de la vía de contacto del dispositivo y de la dosis permitida. Para los dispositivos en contacto con el líquido cefalorraquídeo, el límite es mucho menor; el cálculo debe constar en el informe.