Bioburden是什麼？
生物負荷測試確定滅菌前產品上存在的活微生物種群的數量和性質。由於確定滅菌劑量和製程直接取決於生物負載，因此它是滅菌驗證的基本輸入。
Bioburden的目的
目的是產生設計和驗證滅菌過程所需的微生物基線數據，並監控生產衛生的連續性。
Bioburden適用於哪些產品？
- 醫療器械預滅菌
- 植入物及手術器械
- 免洗套裝
- 無菌包裝組件
- 傷口護理產品
Bioburden應用於哪些行業？
與Bioburden相關的標準
- ISO 11737-1醫療器材中微生物負荷的測定 測試
- ISO 11135
- ISO 11137-1
- ISO 11137-2
- 美國藥典 <61>
Bioburden的測試條件
- 恢復
- 必須驗證從樣本中移除微生物的方法（搖晃、超音波處理、沖洗）
- 回收效率
- 確定該方法回收了多少微生物，並將其作為校正因子應用於結果
- 文化傳媒
- 用於細菌和真菌計數的單獨培養基和培養條件
Bioburden的測試設備
- 超音波發生器和搖床
- 薄膜過濾裝置
- 孵化器
- 菌落計數系統
- 生物安全櫃
Bioburden的樣品要求
- 滅菌前從生產線取出的產品
- 樣本數量根據 ISO 11737-1 確定
- 必須記錄採樣日期、生產線和批次信息
- 標本必須在不允許微生物生長的條件下運輸
Bioburden的測試時程
初始研究，包括恢復研究，需要幾週的時間；根據潛伏期，常規監測結果可在幾天內獲得。
Bioburden的測試程序
- 1選擇回收方法並確定其效率。
- 2標本在無菌條件下採集。
- 3微生物已從產品中去除。
- 4將所得液體接種到培養基中或過濾。
- 5它在適當的溫度和持續時間下孵化。
- 6透過回收因子對菌落進行計數和校正。
- 7結果以每個產品的 CFU 形式報告。
Bioburden的允收準則
生物負荷測試本身沒有接受限制；結果是一個輸入。該組織為滅菌驗證中使用的生物負荷水平定義了警報和行動限制，並將常規結果與這些限制進行比較。
結果評估
結果被評估為隨時間變化的趨勢。生物負荷的增加可能需要重新評估滅菌劑量；因此，常規監測是維持滅菌有效性的一部分。
Bioburden測試報告
- 適用標準和方法
- 樣品描述、批次和取樣日期
- 回收方法及效率係數
- 培養基和培養條件
- 每個產品的 CFU 結果
- 與警報/行動限制的比較
認證
EUROLAB 擁有 IAF 和 ILAC 多邊認可安排締約方認證機構獲得的國際認可認證，根據 ISO/IEC 17025 實驗室測試、ISO/IEC 17020 檢查和監督以及 ISO/IEC 17021-1 和 ISO/IEC 17065 系統和產品認證。該鏈條確保所發布的報告和證書在全球範圍內得到接受。
是否可以在認可範圍內提供此測試取決於您的產品和所採用的標準；由於認證是基於方法的，因此範圍在報價階段以書面形式確認。
範圍和授權相關規定
- MDR（歐盟）2017/745
- ISO 11135 / ISO 11137
藥物分析 — 此測試領域涵蓋哪些內容？
以下段落說明 Bioburden 測試所屬的領域；此測試本身的條件與允收標準列於上方各節。您產品專屬的範圍將在報價階段以書面確認。
药学分析用以确定药品活性成分及成品的成分、纯度、含量及其特性。此领域与其他领域的区别在于,相关方法大多载於药典中:《欧洲药典》(Ph. Eur.)与《美国药典》(USP)均同时提供分析方法及接受标准。
药典方法的约束力决定了该领域的工作模式。虽然其他产业的实验室可以选择合适的方法,但在此领域中,专论中所载明的方法才是依归;若要采用替代方法,则必须证明其等效性。这确保了结果在全球范围内具有可比性。
分析工作分为几个组别进行。鉴别与含量测定(HPLC、UV、滴定)可显示产品的成分及其所含有效成分的量。杂质图谱与残留溶剂分析,旨在检测生产过程中产生的非预期化合物。元素杂质分析,针对源自催化剂及设备的金属进行处理。溶解与分散行为,是反映药物在体内释放行为最重要的体外指标。
溶解度试验是该领域中最关键的测量项目之一。一片药锭仅含有正确剂量的有效成分是不够的;该成分还必须以适当的速率溶解。溶解曲线可用於评估配方变更对生体可用率的影响,并在通用药品的许可审查中占据核心地位。
方法验证是此系列中不可或缺的一环。若采用药典方法,则须确认该方法在该实验室的条件下能正常运作。若开发自有方法,则须依据线性度、精密度、准确度、选择性、检测限与定量限、稳健性等参数进行验证。以未经验证的方法所产生的结果,不得用於许可申请文件中。
稳定性研究决定产品保质期,也是该领域中耗时最长的作业。产品会在指定的温度和湿度条件下静置,并於特定间隔进行分析,其结果将作为保质期及储存条件声明的依据。加速条件可提供初步资讯,但即时数据才是关键所在。
微生物学方面则是一项独立的环节:包括微生物总数计数、特定微生物的检测、无菌产品的无菌试验,以及细菌内毒素试验。针对无菌产品,还须进行包装完整性检测与灭菌验证。
数据完整性近年来已成为检查的核心。结果正确还不够;原始数据必须可追溯、不可篡改且可审计。因此,电子记录系统的验证已成为分析工作不可分割的一部分。
此領域的方法群組
鉴别与含量测定
HPLC、UPLC、紫外-可见分光光度法、滴定法,FTIR鉴别确认。
杂质与残留物
相关杂质、降解产物、残留溶剂(顶空GC)、亚硝胺筛查。
元素杂质
通过ICP-MS及ICP-OES测定元素杂质并进行相应风险评估。
理化
溶出与崩解、硬度、脆碎度、剂量单位均匀度、水分含量(卡尔费休法)、粒度。
微生物学
微生物计数、特定微生物、无菌检查、细菌内毒素、防腐剂效力。
稳定性
实时及加速稳定性研究;光稳定性及使用中稳定性。
此領域常見混淆之處
- 药典方法具有约束力;替代方法只有在证明其等效性后方可使用。
- 未经方法验证得出的结果不能用于注册申报档案。
- 加速稳定性不能替代实时数据;保质期须以实时结果为支撑。
- 溶出曲线对仪器类型、搅拌速度及介质敏感;报告中须完整记录相关条件。
- 即使结果正确,数据完整性方面的缺陷仍会在检查中导致不合规。
- 配方或供应商变更须进行分析比对,必要时须开展新的稳定性研究。
這些結果支持哪些決策
- 注册档案及批次放行
- 确定保质期及储存条件
- 方法转移及方法验证
- 供应商来料原料验收控制
- 评估配方变更对生物等效性的影响
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關於Bioburden的常見問題
為什麼生物負荷會影響滅菌劑量？
滅菌以對數方式減少微生物數量。初始微生物計數越高，達到相同無菌保證等級 (SAL) 所需的劑量越高或時間越長。因此，生物負載是劑量確定的直接輸入。
為什麼要測量恢復效率？
並非所有微生物都可以從產品中移除。如果效率因子未知，則真實的生物負荷似乎低於實際值，且滅菌劑量被確定為不足；這是直接的安全風險。