УФ-ВИД-анализ

Что такое UV-VIS — анализ?

Спектрофотометр UV-VIS измеряет, сколько света в ультрафиолетовой и видимой областях поглощает раствор. Поглощение прямо пропорционально концентрации согласно соотношению Бера-Ламберта.

UV-VIS — анализ: цель

Целью является быстрое и недорогое определение концентрации светопоглощающих соединений. В сочетании с цветообразующими реагентами также можно измерить вещества, которые не впитываются сами по себе.

К каким изделиям применяется UV-VIS — анализ?

Такие параметры, как нитраты, фосфаты, ХПК в питьевой и сточной воде.
Анализ активных ингредиентов в фармацевтических продуктах
Измерение цвета и добавок в продуктах питания и напитках
Концентрация УФ-фильтров в косметике
Измерение концентрации ферментов и белков

В каких отраслях применяется UV-VIS — анализ?

ХимияФармацевтикаПищевая продукцияКосметикаОкружающая средаГосударственный секторБиотехнология

Стандарты, связанные с UV-VIS — анализ

Европейская Фармакопея 2.2.25 (абсорбционная спектрофотометрия)
ISO 7887 (качество воды — определение цвета)
ISO 6060/ISO 15705 (химическая потребность в кислороде)

UV-VIS — анализ: условия

Dalga boyu: Максимум поглощения аналита; определенный в методе
Ванна: Кварц в УФ-области, стекло или пластик в видимой области.
линейный диапазон: Его изучают в диапазоне поглощения, где действует Ламберт-Беер.
Слепой: Обнуление производится с помощью растворителя или холостого реагента.

Оборудование для UV-VIS — анализ

УФ-ВИД спектрофотометр
Кварцевые и стеклянные кюветы
Автоматический сменщик кювет
Держатель кювет с регулируемой температурой (для кинетических измерений)

Требования к образцам для UV-VIS — анализ

Образец должен представлять собой прозрачный раствор; мутность искажает результат
При необходимости применяется фильтрация или центрифугирование.
Разбавляется, если концентрация превышает линейный диапазон.
Обычно достаточно нескольких миллилитров образца.

UV-VIS — анализ: продолжительность

Одно измерение занимает секунды. Общая продолжительность зависит от подготовки проб и времени ожидания цветообразующих реакций.

UV-VIS — анализ: порядок проведения

1Пробу растворяют, при необходимости фильтруют и разбавляют.
2Добавляют цветообразующий реагент, если он используется, и соблюдают установленное время ожидания.
3Прибор обнуляется с помощью холостого раствора.
4Измеряют оптическую плотность калибровочных растворов.
5Считывают поглощение образца.
6Концентрация рассчитывается по калибровочной кривой.

UV-VIS — анализ: критерии приёмки

Приемлемость результата определяют путем сравнения со значениями, указанными в фармакопейной статье, пределах сброса или спецификации продукта.

Оценка результатов

Измерение действительно только в пределах диапазона, в котором зависимость Бера-Ламберта является линейной. Отклонение начинается при высоких значениях поглощения; в этом случае результат, полученный без разведения, не является надежным.

UV-VIS — анализ: протокол

Описание образца, дата получения и номер лаборатории
Примененный метод и эталонный стандарт, если таковой имеется.
Прибор и условия измерения
Этапы подготовки проб
Результаты измерений и единицы измерения
Неопределенность измерения (по запросу)
Заявление о том, что результаты относятся только к образцу, представленному на тестирование.

Аккредитация

EUROLAB имеет международно признанную аккредитацию, полученную от органов по аккредитации, являющихся участниками многосторонних соглашений о признании IAF и ILAC, в соответствии с ISO/IEC 17025 для лабораторных испытаний, ISO/IEC 17020 для инспекций и надзора, а также ISO/IEC 17021-1 и ISO/IEC 17065 для сертификации систем и продукции. Эта цепочка гарантирует, что выданные отчеты и сертификаты принимаются по всему миру.

Возможность проведения этого теста в рамках аккредитованной области зависит от вашего продукта и применяемого стандарта; поскольку аккредитация основана на методе, объем работ подтверждается в письменной форме на этапе предложения.

Область применения и разрешения

Соответствующие правила

Положение о контроле за загрязнением воды
Положение о воде, предназначенной для потребления человеком
Монографии Европейской Фармакопеи

Страницы, на которых используется этот метод

Аналитические методы — Что делает эта группа методов?

В разделе ниже описывается область, к которой относится испытание UV-VIS — анализ; условия и критерии приемки именно этого испытания приведены в разделах выше. Объём, специфичный для вашего продукта, подтверждается письменно на этапе коммерческого предложения.

Страницы об аналитических методах — это страницы о МЕТОДЕ ИЗМЕРЕНИЯ, а не об испытании. Это различие важно: «испытание соляным туманом» — это испытание, отвечающее на один вопрос; «ИСП-МС» — это метод, используемый в десятках различных испытаний. Иногда пользователь ищет не испытание, а метод — потому что именно название метода фигурирует в его спецификации.

Это различие становится решающим при выборе лаборатории. Когда клиент просит «анализ тяжёлых металлов», настоящий вопрос заключается в том, каким методом он будет выполнен: РФА быстр и неразрушающий, но не различает соединения; ААС экономичен для одного элемента; ИСП-АЭС определяет несколько элементов; ИСП-МС видит следовые уровни. Один и тот же образец даёт результаты с разными пределами обнаружения и разной неопределённостью в четырёх методах.

Выбор метода производится по трём критериям. ПРЕДЕЛ ОБНАРУЖЕНИЯ: находится ли искомая концентрация в диапазоне, который может определить метод? СОВМЕСТИМОСТЬ С МАТРИЦЕЙ: способен ли метод работать с матрицей образца (пластик, продукт питания, почва, металл), и требуется ли предварительная обработка? СВЯЗЬ СО СПЕЦИФИКАЦИЕЙ: требует ли стандарт на продукцию или законодательство определённого метода? Третий критерий часто перевешивает первые два — спецификация связывает метод.

Страницы методов создают ЦЕПОЧКУ. Методика связана с тестовыми страницами, на которых она используется, со стандартами, на которых основаны эти тесты, с законодательством, с которым связаны эти стандарты, и, в конечном итоге, с режимами доступа к рынку. Цепочка примеров в исходном документе работает следующим образом: РФА → анализ металлов → соответствие RoHS → ограничение содержания тяжелых металлов → страницы с покрытием. По какой бы ссылке пользователь ни перешел, он попадает и на другие.

Подготовка проб – это невидимая половина результата в этом семействе, и она является более серьезным источником ошибок, чем сама методика. Метод разложения, степень измельчения, растворитель для экстракции и степень разбавления заметно меняют результат. Один и тот же образец на одном и том же приборе дает разные результаты при разной подготовке; следовательно, определение метода охватывает и подготовку.

Калибровка и проверка являются третьим определяющим компонентом. Прибор калибруется с использованием сертифицированного эталонного материала, калибровочная кривая периодически проверяется, и в каждой партии отбирается контрольный образец. Без этих действий полученное число невозможно отследить, даже если прибор работает правильно.

Группы методов в этой области

Элементный анализ
ИСП-ОЭС, ИСП-МС, ААС и РФА. Они различаются пределом обнаружения, допуском матрицы и многоэлементной емкостью.
Хроматография
ГХ, ГХ-МС, ВЭЖХ, ЖХ-МС/МС и ионная хроматография. Он разделяет смесь на компоненты и измеряет каждый отдельно.
Спектроскопия
FTIR, комбинационное рассеяние, УФ-Вид и оптическое излучение. Для идентификации материала, идентификации функциональных групп и состава сплава.
Термический анализ
ДСК, ТГА, ДМА и дилатометрия. Температуры перехода, состав, разложение и размерное поведение.
Микроскопия и визуализация
Оптическая микроскопия, SEM-EDS, рентгенография и томография. Структура, дефекты и распределение элементов.
Классическая («мокрая») химия
Титрование, гравиметрия и колориметрия. Используется в качестве эталонного метода и при подтверждении инструментальных результатов.

Часто путаемое в этой области

XRF — инструмент проверки; он видит элементы и не различает соединения. Решение об ограниченном соединении требует подтверждения методом влажной химии.
Формулировка «не обнаружено» не является доказательством отсутствия; она читается вместе с пределом обнаружения метода.
Спецификация связывает метод. Технически лучший метод не принимается, если спецификация требует другого.
Подготовка проб является частью результата; отчет, в котором не указано, что препарат не воспроизводим.
Результаты, полученные разными методами, нельзя сравнивать напрямую; их пределы обнаружения и неопределенности различаются.
Страница метода не является тестовой страницей; какой метод применяется к какому испытанию взят из стандарта на продукцию.

Какие решения подкрепляют эти результаты

Сопоставление метода из спецификации с областью аккредитации лаборатории
Выбор метода по пределу обнаружения и совместимости с матрицей
Подтверждение инструментального результата эталонным методом
Устранение отклонений, связанных с пробоподготовкой

Связанные тесты

UV-VIS — анализ: частые вопросы

Можно ли измерить мутный образец?

Нет. Мутность рассеивает свет, искусственно повышая поглощение. Пробу сначала необходимо отфильтровать или центрифугировать.

Можно ли измерить отдельный компонент смеси?

Только если другие компоненты не поглощают на той же длине волны. Если есть интерференция, необходим хроматографический метод.