Analisi degli allergeni — ELISA/PCR/LC-MS/MS e allergeni nei cosmetici · Prove su cosmetici

Che cos'è Allergen?

L’analisi degli allergeni copre due aree separate. La presenza e la quantità degli allergeni elencati nell'Allegato II del FOOD (UE) 1169/2011 sono determinate mediante ELISA, PCR in tempo reale o LC-MS/MS; R5 ELISA per il glutine è ampiamente utilizzato. NEI COSMETICI, gli allergeni dei profumi, che devono essere etichettati nell'allegato III (CE) 1223/2009, vengono misurati mediante GC-MS.

Scopo di Allergen

L'obiettivo è verificare l'accuratezza della dichiarazione in etichetta e l'efficacia del controllo della contaminazione incrociata. L’allergene non dichiarato è una delle cause più comuni di ritiro di prodotti alimentari.

A quali prodotti si applica Allergen?

Prodotti dichiarati senza glutine
Prodotti da forno e snack
Prodotti dichiarati senza latticini e senza nocciole
Piatti pronti e salse
Prodotti cosmetici profumati

In quali settori si utilizza Allergen?

AlimentiAgricolturaVedere al dettaglioCosmetici

Norme relative a Allergen

Serie TS EN 15634 (rilevamento degli allergeni negli alimenti — presupposti generali e metodi PCR)
AOAC 2012.01 (Determinazione del glutine mediante R5 ELISA)
TS EN ISO 21571 (estrazione dell'acido nucleico)
Serie ISO/TS 20224 (determinazione delle specie animali, PCR in tempo reale)
Serie TS EN 16274 (Determinazione delle sostanze odorose allergeniche nei cosmetici mediante GC-MS)

Condizioni di Allergen

Selezione del metodo: Protein hedefliyse ELISA/LC-MS, DNA hedefliyse PCR
Effetto di elaborazione: Il trattamento termico può denaturare la proteina e ridurre il risultato ELISA
Gluten: Con ELISA R5; Soglia definita per la dichiarazione "senza glutine".
Kozmetik alerjen: Le sostanze elencate nell'allegato III vengono sottoposte a screening tramite GC-MS

Apparecchiatura per Allergen

Lettore di piastre ELISA e incubatore
Sistema PCR in tempo reale
LC-MS/MS
GC-MS (per allergeni cosmetici)
Omogeneizzatore e macinatore

Requisiti del campione per Allergen

Campione rappresentativo omogeneizzato
Se si indaga sulla contaminazione incrociata, possono essere prelevati anche campioni di tamponi di linea.
I parametri di elaborazione devono essere dichiarati
La composizione del profumo e l'elenco INCI devono essere presentati nei cosmetici

Durata di Allergen

I risultati ELISA sono disponibili in tempi relativamente brevi. Le analisi PCR e LC-MS/MS richiedono diversi giorni lavorativi; Lo screening degli allergeni cosmetici richiede tempi simili grazie alla misurazione GC-MS.

Procedura di Allergen

1Vengono determinati l'allergene target e il metodo appropriato.
2Il campione viene omogeneizzato ed estratto.
3Nell'ELISA viene effettuata la misurazione basata sugli anticorpi.
4Nella PCR vengono applicate l'estrazione del DNA e l'amplificazione specie-specifica.
5I peptidi target vengono misurati in LC-MS/MS.
6Nei cosmetici, le sostanze profumate allergeniche vengono sottoposte a screening con GC-MS.

Criteri di accettazione di Allergen

Negli alimenti (UE) 1169/2011 gli allergeni Allegato II devono essere dichiarati evidenziati nella lista degli ingredienti. Stabilisce la soglia definita dal Regolamento (UE) 828/2014 per l'indicazione “senza glutine”. L'Allegato III del Regolamento Cosmetici (CE) 1223/2009 richiede che gli allergeni dei profumi elencati siano indicati separatamente sull'etichetta se sono presenti in concentrazioni superiori a determinate concentrazioni.

Valutazione dei risultati

Un risultato negativo è limitato al limite di rilevamento del metodo e non garantisce l'assenza di allergeni. Inoltre, l'elaborazione può alterare la proteina bersaglio, diminuendo il risultato ELISA; In questo caso, la PCR o la LC-MS/MS sono più affidabili. La gestione della contaminazione incrociata si ottiene attraverso la separazione della produzione e la verifica della pulizia, non attraverso l'analisi.

Rapporto di Allergen

Descrizione del campione ed elenco degli allergeni target
Il metodo applicato e la sua logica
Risultato e limite di rilevazione per ciascun allergene
Informazioni sui parametri di elaborazione
Confronto tra soglia o dichiarazione legislativa

Accreditamento

EUROLAB detiene un accreditamento riconosciuto a livello internazionale ottenuto da organismi di accreditamento parte degli accordi di riconoscimento multilaterale IAF e ILAC, secondo ISO / IEC 17025 per prove di laboratorio, ISO / IEC 17020 per ispezione e sorveglianza e ISO / IEC 17021-1 e ISO / IEC 17065 per certificazione di sistema e prodotto. Questa catena garantisce che i rapporti e i certificati emessi siano accettati in tutto il mondo.

Se questo test può essere offerto nell'ambito accreditato dipende dal prodotto e dallo standard applicato; poiché l'accreditamento è basato sul metodo, l'ambito viene confermato per iscritto in fase di offerta.

Ambito e autorizzazioni

Regolamenti correlati

Regolamento (UE) 1169/2011 sulle informazioni alimentari ai consumatori Allegato II
Dichiarazione senza glutine Regolamento (UE) 828/2014
Regolamento (CE) 1223/2009 sui prodotti cosmetici, Allegato III

Kozmetik Testleri — Cosa copre questo ambito di prova?

La sezione seguente descrive l'ambito a cui appartiene la prova Allergen; le condizioni e i criteri di accettazione di questa prova specifica sono riportati nelle sezioni precedenti. L'ambito specifico del vostro prodotto viene confermato per iscritto in fase di offerta.

Le prove cosmetiche dimostrano che un prodotto rimane microbiologicamente sicuro per tutta la durata d'uso, fornisce le prestazioni dichiarate e non contiene sostanze soggette a restrizione. NON ESISTE APPROVAZIONE DI PRODOTTO in questa famiglia: nessuna autorità approva un prodotto cosmetico; la responsabilità ricade interamente sul fabbricante e sulla persona responsabile stabilita nell'UE.

Questo modello di responsabilità plasma il funzionamento del settore. Prima dell'immissione sul mercato viene preparato un fascicolo informativo sul prodotto (PIF), viene condotta una valutazione di sicurezza (CPSR) e completata la notifica. Il controllo arriva successivamente e richiede il fascicolo; se incompleto, il prodotto viene ritirato dal mercato. I rapporti di prova costituiscono la base probatoria di tale fascicolo.

Sul lato microbiologico esistono due domande diverse, ciascuna risolta da una prova separata. La qualità microbiologica ATTUALE del prodotto viene misurata mediante conteggio e ricerca di microrganismi specifici. L'EFFICACIA del sistema conservante viene esaminata inoculando deliberatamente il prodotto con microrganismi (challenge test): il prodotto resiste a contaminazioni ripetute durante l'uso? Un vasetto di crema viene toccato con il dito a ogni utilizzo; il sistema conservante deve reggere a questo.

Sul lato delle prestazioni si conducono studi di comprova delle rivendicazioni. Per i solari, la determinazione dell'SPF e della protezione UVA e la misurazione della resistenza all'acqua sono obbligatorie e costituiscono la base del valore dichiarato in etichetta. Le evidenze vengono prodotte anche con metodi in vivo o in vitro per rivendicazioni come idratazione, aspetto delle rughe, cura dei capelli e ritenzione del colore.

Sul lato chimico si ricercano sostanze vietate e soggette a restrizione: metalli pesanti, coloranti vietati, concentrazioni di conservanti, livelli di filtri UV e contaminanti come le nitrosammine. I prodotti contenenti nanomateriali sono soggetti a un obbligo di notifica separato.

Il DIVIETO DI SPERIMENTAZIONE ANIMALE è il vincolo più determinante del settore. La sperimentazione animale non può essere effettuata su prodotti finiti né su ingredienti, e un prodotto testato sugli animali non può essere immesso sul mercato. I metodi alternativi in vitro (modelli di pelle umana ricostruita, test basati su colture cellulari) sono quindi al centro del settore, e la valutazione tossicologica si basa in gran parte su dati esistenti, approcci read-across e risultati in vitro.

Gli studi di stabilità e compatibilità con la confezione determinano la durata di conservazione e il periodo dopo l'apertura (PAO). Viene valutata anche l'interazione del prodotto con la confezione: una sostanza attiva può migrare nella confezione, e sostanze che non dovrebbero essere presenti possono passare dalla confezione al prodotto.

Sul lato del processo, la buona pratica di fabbricazione è dimostrata tramite la ISO 22716; ciò è separato dalla prova sul prodotto ma è una parte obbligatoria del fascicolo.

Gruppi di metodi in questo ambito

Qualità microbiologica
Conteggio di batteri aerobi mesofili, lieviti e muffe; ricerca di Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Candida albicans ed E. coli.
Efficacia conservante
Resistenza del sistema conservante alla contaminazione ripetuta tramite challenge test (ISO 11930).
Protezione solare
Determinazione in vivo dell'SPF, determinazione in vitro della protezione UVA, resistenza all'acqua e misurazioni della lunghezza d'onda critica.
Analisi chimica
Metalli pesanti, sostanze vietate e soggette a restrizione, quantificazione di conservanti e filtri UV, screening dei contaminanti.
Valutazione della sicurezza
Metodi in vitro di irritazione e sensibilizzazione, valutazione del rischio tossicologico, calcoli di esposizione.
Stabilità e compatibilità
Stabilità in tempo reale e accelerata, compatibilità con la confezione, determinazione del PAO, monitoraggio sensoriale e fisico-chimico.

Confusioni frequenti in questo ambito

NON esiste marcatura CE sui cosmetici; la conformità è dimostrata tramite il PIF, la valutazione di sicurezza e la notifica.
La persona responsabile deve essere stabilita nell'UE; a meno che l'esportatore non se ne occupi, il prodotto non può essere immesso sul mercato.
La qualità microbiologica e l'efficacia conservante sono prove diverse; un prodotto che risulta pulito può comunque avere un sistema conservante debole.
Il divieto di sperimentazione animale copre anche gli ingredienti; i dati di sperimentazione animale generati per un altro mercato creano un problema di utilizzo.
Una dichiarazione di SPF deve essere supportata da misurazione; un cambio di formulazione richiede una nuova misurazione.
Una modifica della confezione può richiedere la ripetizione degli studi di stabilità e compatibilità.

Quali decisioni supportano questi risultati

Il fascicolo informativo sul prodotto e la valutazione di sicurezza
Verifica della progettazione del sistema conservante
Comprova delle rivendicazioni di SPF ed efficacia
Determinazione della durata di conservazione e del periodo dopo l'apertura
Conformità alle restrizioni del mercato di destinazione nell'esportazione

Test correlati

Domande frequenti su Allergen

Non dovremmo avere un'analisi invece di un avviso "potrebbe contenere"?

L’analisi serve a dimostrare che il rischio di contaminazione incrociata è gestito, ma da sola non è sufficiente. L'avviso deve basarsi su un'effettiva valutazione del rischio; L’analisi supporta, non sostituisce, questa valutazione.

Perché ELISA ha pochi prodotti trattati termicamente?

Il trattamento termico modifica la struttura della proteina e può distruggere le regioni riconosciute dall'anticorpo. In questo caso il risultato potrebbe essere inferiore alla realtà; La PCR mirata al DNA o la LC-MS/MS mirata al peptide sarebbero più appropriate.