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Ensayos de alimentos · Mikrobiyoloji

Listeria monocytogenes

ISO 11290-1 (buscar)ISO 11290-2 (recuento)ISO 20776 / ISO 16140-2 (método de verificación alternativo)UE 2073/2005 Anexo I (criterios para alimentos listos para el consumo)
Ensayos de alimentos trabajo de laboratorio

¿Qué es Listeria monocytogenes?

Listeria monocytogenes es un patógeno alimentario que puede crecer incluso a temperaturas de refrigerador. ISO 11290 define dos métodos separados: la primera parte es la búsqueda de la presencia de bacterias (presencia/ausencia en una determinada cantidad de muestra), la segunda parte es su recuento.

Objetivo de Listeria monocytogenes

El objetivo es determinar si este patógeno está presente, especialmente en productos fríos, listos para el consumo y con una larga vida útil. La listeriosis es rara, pero su curso es grave en mujeres embarazadas, ancianos y personas inmunodeprimidas; Por eso la legislación le da un lugar especial a este patógeno.

¿A qué productos se aplica Listeria monocytogenes?

  • Productos cárnicos y pesqueros listos para el consumo (salmón ahumado, delicatessen)
  • Quesos tiernos y productos elaborados con leche cruda.
  • Ensaladas y sándwiches preparados
  • Verduras congeladas y platos preparados.
  • Hisopos de superficie de línea de producción

¿En qué sectores se utiliza Listeria monocytogenes?

AlimentosBeberAgriculturaMinoristaYem

Normas relacionadas con Listeria monocytogenes

  • ISO 11290-1 (buscar)
  • ISO 11290-2 (recuento)
  • ISO 20776 / ISO 16140-2 (método de verificación alternativo)
  • UE 2073/2005 Anexo I (criterios para alimentos listos para el consumo)

Condiciones de Listeria monocytogenes

Método
Buscar (presente/ausente) o contar; Se selecciona según los criterios a los que está sujeto el producto.
Enriquecimiento
Enriquecimiento en dos pasos en caldo semiselectivo y selectivo
medios selectivos
ALOA (Agar Listeria Ottaviani-Agosti) y un segundo medio selectivo
Verificación
Confirmación bioquímica y hemólisis en colonias típicas.

Equipo para Listeria monocytogenes

  • Gabinete de bioseguridad clase II
  • Incubadoras con temperatura controlada
  • Stomacher (homogeneizador peristáltico) y bolsas estériles
  • Autoclave y esterilizador de aire seco.
  • Aparato de conteo de colonias y microscopio.

Requisitos de muestra para Listeria monocytogenes

  • La muestra debe enviarse en su envase original, sin abrir.
  • Los productos que requieran cadena de frío deben entregarse con hielera y sin romper la cadena.
  • Se deben seguir reglas de muestreo aséptico; El recipiente debe estar esterilizado.
  • La información del lote, la fecha de producción y la fecha de vencimiento se debe informar con la muestra.
  • La cantidad requerida para el análisis varía según el tipo de producto; La confirmación debe recibirse antes del envío.

Duración de Listeria monocytogenes

Debido al enriquecimiento y verificación en dos pasos, el análisis de búsqueda es un proceso de aproximadamente una semana. Los métodos rápidos (detección basada en PCR) dan resultados negativos tempranamente; Las pruebas positivas se confirman mediante cultivo.

Procedimiento de Listeria monocytogenes

  1. 1La muestra se pesa y se transfiere a un medio de enriquecimiento semiselectivo.
  2. 2El primer enriquecimiento se realiza a una temperatura y tiempo definidos.
  3. 3Se realiza la transferencia del cultivo al segundo medio de enriquecimiento selectivo.
  4. 4La siembra se realiza en medios sólidos selectivos.
  5. 5Se seleccionan colonias típicas y se realizan experimentos de confirmación.
  6. 6El resultado se informa como presencia/ausencia o ufc/g en la cantidad de muestra.

Criterios de aceptación de Listeria monocytogenes

La legislación, no el método, determina si el resultado se considerará adecuado o no. El comunicado pertinente del Codex alimentario turco, UE 2073/2005 y 1881/2006 y las especificaciones de la empresa compradora definen diferentes límites según el grupo de productos; El informe proporciona el valor medido y toma el límite de la legislación aplicable.

Evaluación de resultados

La evaluación depende de la categoría a la que pertenece el producto en la UE 2073/2005 y el Codex alimentario turco. Los productos que admiten reproducción y los que no, están sujetos a criterios diferentes durante su vida útil; El estudio de vida útil muestra si es compatible con la reproducción o no.

Informe de Listeria monocytogenes

  • Descripción de la muestra, información de lote/lote y condiciones de llegada.
  • Método de muestreo (si lo toma el laboratorio)
  • Método de análisis aplicado y estándar de referencia.
  • Fecha de análisis y condiciones de incubación, si las hubiera.
  • Resultado y su unidad
  • Incertidumbre de medición (si se solicita)
  • Una declaración de que el resultado se aplica únicamente a la muestra enviada para la prueba.

Acreditación

EUROLAB posee una acreditación reconocida internacionalmente obtenida de organismos de acreditación que forman parte de los acuerdos de reconocimiento multilateral de IAF e ILAC, según ISO/IEC 17025 para pruebas de laboratorio, ISO/IEC 17020 para inspección y vigilancia, e ISO/IEC 17021-1 e ISO/IEC 17065 para certificación de sistemas y productos. Esta cadena garantiza que los informes y certificados emitidos sean aceptados en todo el mundo.

La posibilidad de ofrecer esta prueba dentro del alcance acreditado depende de su producto y del estándar aplicado; Dado que la acreditación se basa en métodos, el alcance se confirma por escrito en la etapa de cotización.

Alcance y autorizaciones

Regulaciones Relacionadas

  • Reglamento de criterios microbiológicos del Codex alimentario turco
  • UE 2073/2005 — criterios microbiológicos para productos alimenticios
  • Ley N.º 5996 de Servicios Veterinarios, Sanidad Vegetal, Alimentos y Piensos

Ensayos de alimentos — ¿Qué abarca este campo de ensayo?

La siguiente sección describe el campo al que pertenece el ensayo Listeria monocytogenes; las condiciones y criterios de aceptación de este ensayo en particular figuran en las secciones anteriores. El alcance específico de su producto se confirma por escrito en la etapa de cotización.

Los ensayos alimentarios muestran que un producto es seguro para el consumo y contiene lo que indica su etiqueta. La familia trabaja en tres ejes: seguridad microbiológica, seguridad química y composición nutricional. Los tres requieren infraestructura de laboratorio distinta, un cuerpo de métodos distinto y un plazo de respuesta distinto.

El rasgo más distintivo del ámbito es la PRESIÓN TEMPORAL. Una probeta de acero puede esperar en un estante; una muestra de leche cruda o carne fresca no puede. La hora de toma de la muestra, la temperatura de transporte y el tiempo hasta llegar al laboratorio determinan directamente la validez del resultado. Por ello, en microbiología alimentaria el registro de la cadena de frío es parte inseparable del informe de ensayo.

En el lado microbiológico hay dos preguntas distintas que no deben confundirse. La DETECCIÓN de un patógeno es una pregunta cualitativa: ¿está presente la Salmonella en la muestra o no? El RECUENTO de organismos indicadores es una pregunta cuantitativa e indicador de la higiene de producción. La ausencia de un patógeno en un producto no demuestra que la higiene sea buena; si el recuento total de aerobios mesófilos es alto, hay un problema en el proceso.

En el lado químico se miden residuos de plaguicidas, micotoxinas, metales pesados, aditivos, residuos de medicamentos veterinarios y contaminantes de proceso (acrilamida, furano, HAP). Los métodos multirresiduo en este ámbito (LC-MS/MS y GC-MS/MS basados en QuEChERS) pueden cribar cientos de sustancias activas en un solo análisis; los límites se definen por separado para cada par producto-sustancia.

En el lado de la composición se determinan proteína, grasa, humedad, cenizas, fibra, perfil de azúcares, composición de ácidos grasos y contenido de vitaminas y minerales. Estos valores son la base de la declaración nutricional de la etiqueta y los rangos de tolerancia están definidos en la legislación — la diferencia entre el valor declarado y el medido debe mantenerse dentro de esa tolerancia.

NO existe el marcado CE en alimentos, y esto determina cómo funciona el ámbito. La conformidad se demuestra mediante el funcionamiento de un sistema de seguridad alimentaria basado en el APPCC, el cumplimiento de las normas de etiquetado y el no superar los límites de contaminantes, residuos y microbiológicos. Un resultado de ensayo aporta evidencia no para un certificado, sino para un sistema en funcionamiento.

La gestión de alérgenos tiene un peso especial. La presencia de un alérgeno no declarado en un producto es una de las causas más frecuentes de retiradas de alimentos. El análisis aquí va junto con la validación de limpieza: se demuestra que la línea se ha limpiado adecuadamente tras una producción que contenía un alérgeno y que el riesgo de contaminación cruzada está bajo control.

Los esquemas voluntarios se han vuelto de facto obligatorios en este ámbito. Las cadenas minoristas exigen a sus proveedores un certificado bajo un esquema reconocido por GFSI (BRCGS, IFS, FSSC 22000); sin él, llegar a la estantería es prácticamente imposible.

Grupos de métodos en este campo

  • Detección de patógenos

    Detección de Salmonella, Listeria monocytogenes, Campylobacter, Cronobacter y E. coli productor de toxina Shiga; métodos basados en cultivo y moleculares.

  • Recuentos de indicadores

    Recuento aerobio mesófilo total, Enterobacteriaceae, coliformes y E. coli, estafilococos coagulasa positivos, levaduras y mohos, bacterias del ácido láctico, Clostridia sulfito-reductores.

  • Residuos de plaguicidas y veterinarios

    Cribado multirresiduo mediante LC-MS/MS y GC-MS/MS con extracción QuEChERS.

  • Micotoxinas y contaminantes

    Aflatoxinas, ocratoxina A, desoxinivalenol, patulina; metales pesados (ICP-MS), acrilamida y compuestos HAP.

  • Composición nutricional

    Proteína Kjeldahl, perfil de grasa y ácidos grasos, humedad, cenizas, fibra dietética, perfil de azúcares, análisis de vitaminas y minerales.

  • Alérgenos y autenticidad

    Análisis de alérgenos de gluten, leche, huevo, frutos secos y soja; métodos moleculares para identificación de especies y detección de adulteración.

Confusiones frecuentes en este campo

  • El muestreo es la mitad del resultado. Una muestra transportada a temperatura incorrecta o con retraso da un resultado inválido aunque se analice correctamente en el laboratorio.
  • La ausencia de un patógeno no demuestra que la higiene sea buena; los recuentos de indicadores dan información distinta y ambos se interpretan juntos.
  • Un resultado de una muestra tomada de un lote solo puede generalizarse a todo el lote si el plan de muestreo se estableció de forma estadística.
  • Los límites se definen en reglamentos separados por grupo de producto y se actualizan periódicamente; una decisión de conformidad basada en una tabla de límites obsoleta puede ser errónea.
  • En las exportaciones, los límites del país de destino pueden diferir de los límites de la UE; el mismo producto puede ser conforme en un mercado y no conforme en otro.

Qué decisiones respaldan estos resultados

  • Verificación del plan APPCC y seguimiento del proceso
  • La base de la declaración nutricional y la información de alérgenos en la etiqueta
  • Certificados sanitarios antes de la exportación y cumplimiento de los límites del mercado de destino
  • Control de aceptación por proveedor y por lote
  • Estudios de vida útil y determinación de las condiciones de almacenamiento
  • Generación de evidencias para auditorías bajo esquemas reconocidos por GFSI

Pruebas relacionadas

Preguntas frecuentes sobre Listeria monocytogenes

¿Guardarlo en el frigorífico elimina el riesgo de contraer Listeria?

No. Listeria monocytogenes puede seguir reproduciéndose, aunque lentamente, en ambientes fríos. Por tanto, el riesgo no disminuye en productos fríos y de larga vida útil, sino que puede aumentar con el tiempo.

¿Se debe solicitar una convocatoria o un conteo?

Esto está determinado por los criterios a los que está sujeto el producto. En algunos productos se requiere que no esté presente en una determinada cantidad de muestra, y en otros se requiere que no supere un determinado nivel durante toda su vida útil.

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