Sterilitätstest — ISO 11737-2 / EP 2.6.1 · Pharmazeutische Analyse

Was ist Sterility?

Der Sterilitätstest untersucht, ob im sterilisierten Produkt durch Inkubation in Kulturmedien lebensfähige Mikroorganismen vorhanden sind. Es gibt eine wichtige Einschränkung: Der Test wird an einer statistischen Probe durchgeführt und weist KEINE Sterilität nach. Die Gewährleistung der Sterilität wird in erster Linie durch die Validierung des Sterilisationsprozesses erreicht.

Zweck von Sterility

Der Zweck besteht darin, in Validierungsstudien zum Sterilisationsprozess und in der Routineüberwachung unterstützende Beweise für die Sterilität des Produkts zu liefern.

Bei welchen Produkten wird Sterility angewendet?

Sterile medizinische Einwegprodukte
Implantate
OP-Sets und Abdecktücher
Spritzen- und Infusionssets
Steril verpackte Wundversorgungsprodukte

In welchen Branchen wird Sterility eingesetzt?

Medizinisches GerätGesundheitspflegeArzneimittel

Normen zu Sterility

ISO 11737-2Sterilitätstest in der Sterilisationsüberprüfung prüfen
ISO 11737-1Bestimmung der mikrobiellen Belastung in Medizinprodukten prüfen
EP 2.6.1
USP <71>
ISO 11135
ISO 11137

Prüfbedingungen für Sterility

Verfahren: Membranfiltration oder Direktimpfung; je nach Produkt ausgewählt
Kulturmedien: Es werden Medien verwendet, die für aerobes und anaerobes Wachstum geeignet sind
Inkubation: Bei den im Arzneibuch festgelegten Temperaturen und für die Dauer (üblicherweise 14 Tage)
Umfeld: Aseptisches Arbeiten in einem klassifizierten Reinraum oder Isolator

Prüfgerät für Sterility

Isolator oder Reinraumschrank der Klasse A
Membranfiltrationseinheit
Inkubatoren (bei verschiedenen Temperaturen)
Infrastruktur für Autoklaven und Kulturmedienvorbereitung

Probenanforderungen für Sterility

Das sterile Produkt zusammen mit seiner Endverpackung
Die Anzahl der Proben richtet sich nach dem Arzneibuch und der Chargengröße
Die Sterilisationsmethode und die Chargeninformationen müssen angegeben werden
Die Verpackungsintegrität muss intakt sein

Dauer von Sterility

Die Inkubationszeit beträgt typischerweise 14 Tage; Die Dauer verlängert sich, wenn erstmals eine Methodeneignungsstudie (Bakteriostase/Fungistase) durchgeführt wird.

Ablauf von Sterility

1Es wird eine Methodeneignungsstudie durchgeführt oder auf eine bestehende Studie verwiesen.
2Die Probe wird unter aseptischen Bedingungen aus der Verpackung entnommen.
3Es kommt Membranfiltration oder Direktimpfung zum Einsatz.
4Kulturmedien werden bei den definierten Temperaturen inkubiert.
5Während der Inkubation wird regelmäßig Wachstum beobachtet.
6Wenn Wachstum beobachtet wird, wird der Mikroorganismus identifiziert und die Quelle untersucht.
7Ergebnisse werden gemeldet.

Annahmekriterien für Sterility

Das Akzeptanzkriterium besteht darin, dass am Ende der Inkubationszeit in keinem Medium ein Wachstum zu beobachten ist. Kommt es zu Bewuchs, wird untersucht, ob es sich um eine echte Kontamination oder eine Kontamination während des Tests handelt.

Auswertung der Ergebnisse

Das Ergebnis wird zusammen mit den Sterilisationsvalidierungsdaten interpretiert. Ein negatives Testergebnis ist kein Beweis für Sterilität; Der Sterilitätssicherungsgrad (SAL) wird durch Prozessvalidierung nachgewiesen.

Prüfbericht zu Sterility

Angewandtes Arzneibuch/Standard und Methode
Probenbeschreibung, Charge und Sterilisationsmethode
Verweis auf die Methodeneignungsstudie
Kulturmedien, Inkubationsbedingungen und -dauer
Wachstumsbeobachtungen und Ergebnis

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Pharmazeutische Analyse — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test Sterility gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Die pharmazeutische Analyse dient der Bestimmung der Identität, Reinheit, Menge und des Verhaltens des Wirkstoffs und des Fertigarzneimittels. Das Besondere an diesem Bereich ist, dass die Methoden weitgehend in den PHARMAKOPÖEN definiert sind: Sowohl die Europäische Pharmakopöe (Ph. Eur.) als auch die Pharmakopöe der Vereinigten Staaten (USP) legen sowohl die Methode als auch den Rahmen für die Anerkennung fest.

Die Verbindlichkeit der Pharmakopöe-Methode bestimmt die Arbeitsweise in diesem Bereich. Während in anderen Branchen das Labor eine geeignete Methode auswählen kann, ist hier die in der Monografie beschriebene Methode maßgebend; soll eine alternative Methode verwendet werden, muss deren Gleichwertigkeit nachgewiesen werden. Dies gewährleistet, dass die Ergebnisse weltweit vergleichbar sind.

Die Analysen werden in mehreren Gruppen durchgeführt. Die Identifizierung und Quantifizierung (HPLC, UV, Titration) zeigen, um welches Produkt es sich handelt und wie viel Wirkstoff es enthält. Das Verunreinigungsprofil und die Untersuchung auf Lösungsmittelrückstände dienen der Erkennung unerwünschter Verbindungen, die aus dem Herstellungsprozess stammen. Elementverunreinigungen beziehen sich auf Metalle, die aus Katalysatoren und Anlagen stammen. Das Auflösungs- und Verteilungsverhalten ist der wichtigste In-vitro-Indikator für das Freisetzungsverhalten des Arzneimittels im Körper.

Der Auflösungsversuch ist eine der wichtigsten Messungen in diesem Bereich. Es reicht nicht aus, dass eine Tablette die richtige Menge an Wirkstoff enthält; dieser Wirkstoff muss sich auch mit der richtigen Geschwindigkeit auflösen. Das Auflösungsprofil wird zur Bewertung der Auswirkungen von Änderungen an der Formulierung auf die Bioverfügbarkeit herangezogen und spielt bei der Zulassung von Generika eine zentrale Rolle.

Die VALIDIERUNG DER METHODE ist in dieser Produktfamilie ein obligatorischer Schritt. Wird eine Pharmakopöe-Methode verwendet, wird überprüft, ob die Methode unter den Bedingungen des jeweiligen Labors ordnungsgemäß funktioniert. Wurde eine eigene Methode entwickelt, wird diese anhand von Parametern wie Linearität, Präzision, Richtigkeit, Selektivität, Nachweis- und Bestimmungsgrenze sowie Robustheit validiert. Ergebnisse, die mit einer nicht validierten Methode erzielt wurden, dürfen nicht in den Zulassungsunterlagen verwendet werden.

Stabilitätsuntersuchungen bestimmen die Haltbarkeitsdauer und sind der zeitaufwändigste Arbeitsschritt in diesem Bereich. Das Produkt wird unter den für das jeweilige Produkt festgelegten Temperatur- und Feuchtigkeitsbedingungen gelagert, in bestimmten Abständen analysiert, und die Ergebnisse dienen als Grundlage für die Angabe der Haltbarkeitsdauer und der Lagerbedingungen. Beschleunigte Tests liefern zwar erste Anhaltspunkte, doch entscheidend sind die Echtzeitdaten.

Der mikrobiologische Bereich ist ein eigenständiger Teilbereich: Bestimmung der Keimzahl, Nachweis bestimmter Mikroorganismen, Sterilitätsprüfung bei sterilen Produkten und Prüfung auf bakterielle Endotoxine. Bei sterilen Produkten kommen zudem die Überprüfung der Verpackungsintegrität und die Sterilisationsvalidierung hinzu.

Die Datenintegrität ist in den letzten Jahren in den Mittelpunkt der Inspektionen gerückt. Es genügt nicht, dass das Ergebnis korrekt ist; die Rohdaten müssen rückverfolgbar, unveränderbar und prüfbar sein. Die Validierung elektronischer Aufzeichnungssysteme ist daher zu einem untrennbaren Teil der Analyse geworden.

Methodengruppen in diesem Bereich

Identität und Gehalt
HPLC, UPLC, UV-Vis-Spektrophotometrie, Titration, Identitätsbestätigung mittels FTIR.
Verunreinigungen und Rückstände
Verwandte Verunreinigungen, Abbauprodukte, Restlösungsmittel (GC-Headspace), Nitrosamin-Screening.
Elementverunreinigungen
Bestimmung von Elementverunreinigungen mittels ICP-MS und ICP-OES sowie zugehörige Risikobewertung.
Physikalisch-chemisch
Freisetzung und Zerfall, Härte, Abrieb, Gleichförmigkeit der Dosiereinheiten, Wassergehalt (Karl Fischer), Partikelgröße.
Mikrobiologisch
Mikrobielle Keimzahlbestimmung, spezifizierte Mikroorganismen, Sterilität, bakterielles Endotoxin, Konservierungsmittelwirksamkeit.
Stabilität
Echtzeit- und beschleunigte Stabilitätsstudien; Photostabilität und Stabilität während der Anwendung.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Die Arzneibuchmethode ist bindend; eine alternative Methode darf nur durch Nachweis ihrer Gleichwertigkeit verwendet werden.
Ein ohne Methodenvalidierung erzeugtes Ergebnis darf nicht in einem Zulassungsdossier verwendet werden.
Die beschleunigte Stabilität ersetzt nicht die Echtzeitdaten; die Haltbarkeit wird durch Echtzeitergebnisse gestützt.
Das Freisetzungsprofil ist empfindlich gegenüber Apparatetyp, Rührgeschwindigkeit und Medium; die Bedingungen müssen im Bericht vollständig sein.
Ein Mangel an Datenintegrität führt bei einer Inspektion zu einer Nichtkonformität, selbst wenn das Ergebnis korrekt ist.
Eine Änderung der Formulierung oder des Lieferanten erfordert einen analytischen Vergleich und, falls erforderlich, eine neue Stabilitätsstudie.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

Zulassungsdossier und Chargenfreigabe
Bestimmung von Haltbarkeit und Lagerbedingungen
Methodentransfer und Methodenvalidierung
Wareneingangskontrolle von Rohstoffen der Lieferanten
Bewertung der Auswirkung einer Formulierungsänderung auf die Bioäquivalenz

Häufige Fragen zu Sterility

Beweist der Sterilitätstest, dass mein Produkt steril ist?

Nein. Der Test wird an einer begrenzten Anzahl von Proben durchgeführt und weist eine geringe Wahrscheinlichkeit auf, geringfügige Kontaminationen festzustellen. Die Gewährleistung der Sterilität wird durch die Validierung des Sterilisationsprozesses gemäß ISO 11135 oder ISO 11137 erreicht; Der Sterilitätstest ist eine unterstützende Kontrolle.

Warum ist eine Methodeneignungsstudie notwendig?

Aus dem Produkt migrierende antimikrobielle Substanzen können das Wachstum im Kulturmedium unterdrücken; In diesem Fall führt selbst ein kontaminiertes Produkt zu einem negativen Ergebnis. Die Eignungsstudie zeigt, dass das Produkt nicht wachstumshemmend ist und ist Voraussetzung für die Validität des Tests.

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