Bioburden-Test — ISO 11737-1 · Pharmazeutische Analyse

Was ist Bioburden?

Der Keimbelastungstest bestimmt die Anzahl und Art der lebensfähigen Mikroorganismenpopulation, die vor der Sterilisation auf dem Produkt vorhanden ist. Da die Bestimmung der Sterilisationsdosis und des Sterilisationsprozesses direkt von der Keimbelastung abhängt, ist sie ein grundlegender Input für die Sterilisationsvalidierung.

Zweck von Bioburden

Der Zweck besteht darin, die mikrobiologischen Basisdaten zu erstellen, die für die Gestaltung und Überprüfung des Sterilisationsprozesses erforderlich sind, und die Kontinuität der Produktionshygiene zu überwachen.

Bei welchen Produkten wird Bioburden angewendet?

Medizinische Geräte vor der Sterilisation
Implantate und chirurgische Instrumente
Einwegsets
Komponenten der Sterilverpackung
Produkte zur Wundversorgung

In welchen Branchen wird Bioburden eingesetzt?

Medizinisches GerätGesundheitspflegeArzneimittel

Normen zu Bioburden

ISO 11737-1Bestimmung der mikrobiellen Belastung in Medizinprodukten prüfen
ISO 11135
ISO 11137-1
ISO 11137-2
USP <61>

Prüfbedingungen für Bioburden

Erholung: Die Methode zur Entfernung von Mikroorganismen aus der Probe (Schütteln, Beschallung, Spülen) muss validiert werden
Wiederherstellungseffizienz: Es wird ermittelt, wie viel Mikroorganismus die Methode zurückgewinnt und als Korrekturfaktor auf das Ergebnis angewendet
Kulturmedien: Separate Kulturmedien und Inkubationsbedingungen für die Bakterien- und Pilzzählung

Prüfgerät für Bioburden

Sonicator und Shaker
Membranfiltrationseinheit
Inkubatoren
Koloniezählsystem
Biosicherheitsschrank

Probenanforderungen für Bioburden

Produkt, das vor der Sterilisation aus der Produktionslinie entnommen wird
Die Anzahl der Proben wird gemäß ISO 11737-1 bestimmt
Das Probenahmedatum, die Linien- und Chargeninformationen müssen aufgezeichnet werden
Der Transport der Proben muss unter Bedingungen erfolgen, die kein mikrobielles Wachstum zulassen

Dauer von Bioburden

Die Erststudie, einschließlich der Genesungsstudie, dauert mehrere Wochen; Routineüberwachungsergebnisse werden abhängig von der Inkubationszeit innerhalb von Tagen erhalten.

Ablauf von Bioburden

1Die Wiederherstellungsmethode wird ausgewählt und ihre Effizienz bestimmt.
2Die Probenentnahme erfolgt unter aseptischen Bedingungen.
3Mikroorganismen werden aus dem Produkt entfernt.
4Die resultierende Flüssigkeit wird in Kulturmedien eingeimpft oder filtriert.
5Es wird bei der entsprechenden Temperatur und Dauer inkubiert.
6Kolonien werden gezählt und um den Erholungsfaktor korrigiert.
7Das Ergebnis wird als KBE pro Produkt angegeben.

Annahmekriterien für Bioburden

Für den Keimbelastungstest gibt es keine eigene Akzeptanzgrenze; Das Ergebnis ist eine Eingabe. Die Organisation definiert einen Warn- und Aktionsgrenzwert für die Keimbelastung, die bei der Sterilisationsvalidierung verwendet wird, und vergleicht Routineergebnisse mit diesen Grenzwerten.

Auswertung der Ergebnisse

Die Ergebnisse werden als Trend im Zeitverlauf ausgewertet. Eine Erhöhung der Keimbelastung kann eine Neubewertung der Sterilisationsdosis erforderlich machen; Eine routinemäßige Überwachung ist daher Teil der Aufrechterhaltung der Sterilisationsvalidität.

Prüfbericht zu Bioburden

Angewandter Standard und Methode
Probenbeschreibung, Charge und Probenahmedatum
Rückgewinnungsmethode und Effizienzfaktor
Kulturmedien und Inkubationsbedingungen
CFU-Ergebnisse pro Produkt
Vergleich mit Alarm-/Aktionsgrenzen

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Pharmazeutische Analyse — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test Bioburden gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Die pharmazeutische Analyse dient der Bestimmung der Identität, Reinheit, Menge und des Verhaltens des Wirkstoffs und des Fertigarzneimittels. Das Besondere an diesem Bereich ist, dass die Methoden weitgehend in den PHARMAKOPÖEN definiert sind: Sowohl die Europäische Pharmakopöe (Ph. Eur.) als auch die Pharmakopöe der Vereinigten Staaten (USP) legen sowohl die Methode als auch den Rahmen für die Anerkennung fest.

Die Verbindlichkeit der Pharmakopöe-Methode bestimmt die Arbeitsweise in diesem Bereich. Während in anderen Branchen das Labor eine geeignete Methode auswählen kann, ist hier die in der Monografie beschriebene Methode maßgebend; soll eine alternative Methode verwendet werden, muss deren Gleichwertigkeit nachgewiesen werden. Dies gewährleistet, dass die Ergebnisse weltweit vergleichbar sind.

Die Analysen werden in mehreren Gruppen durchgeführt. Die Identifizierung und Quantifizierung (HPLC, UV, Titration) zeigen, um welches Produkt es sich handelt und wie viel Wirkstoff es enthält. Das Verunreinigungsprofil und die Untersuchung auf Lösungsmittelrückstände dienen der Erkennung unerwünschter Verbindungen, die aus dem Herstellungsprozess stammen. Elementverunreinigungen beziehen sich auf Metalle, die aus Katalysatoren und Anlagen stammen. Das Auflösungs- und Verteilungsverhalten ist der wichtigste In-vitro-Indikator für das Freisetzungsverhalten des Arzneimittels im Körper.

Der Auflösungsversuch ist eine der wichtigsten Messungen in diesem Bereich. Es reicht nicht aus, dass eine Tablette die richtige Menge an Wirkstoff enthält; dieser Wirkstoff muss sich auch mit der richtigen Geschwindigkeit auflösen. Das Auflösungsprofil wird zur Bewertung der Auswirkungen von Änderungen an der Formulierung auf die Bioverfügbarkeit herangezogen und spielt bei der Zulassung von Generika eine zentrale Rolle.

Die VALIDIERUNG DER METHODE ist in dieser Produktfamilie ein obligatorischer Schritt. Wird eine Pharmakopöe-Methode verwendet, wird überprüft, ob die Methode unter den Bedingungen des jeweiligen Labors ordnungsgemäß funktioniert. Wurde eine eigene Methode entwickelt, wird diese anhand von Parametern wie Linearität, Präzision, Richtigkeit, Selektivität, Nachweis- und Bestimmungsgrenze sowie Robustheit validiert. Ergebnisse, die mit einer nicht validierten Methode erzielt wurden, dürfen nicht in den Zulassungsunterlagen verwendet werden.

Stabilitätsuntersuchungen bestimmen die Haltbarkeitsdauer und sind der zeitaufwändigste Arbeitsschritt in diesem Bereich. Das Produkt wird unter den für das jeweilige Produkt festgelegten Temperatur- und Feuchtigkeitsbedingungen gelagert, in bestimmten Abständen analysiert, und die Ergebnisse dienen als Grundlage für die Angabe der Haltbarkeitsdauer und der Lagerbedingungen. Beschleunigte Tests liefern zwar erste Anhaltspunkte, doch entscheidend sind die Echtzeitdaten.

Der mikrobiologische Bereich ist ein eigenständiger Teilbereich: Bestimmung der Keimzahl, Nachweis bestimmter Mikroorganismen, Sterilitätsprüfung bei sterilen Produkten und Prüfung auf bakterielle Endotoxine. Bei sterilen Produkten kommen zudem die Überprüfung der Verpackungsintegrität und die Sterilisationsvalidierung hinzu.

Die Datenintegrität ist in den letzten Jahren in den Mittelpunkt der Inspektionen gerückt. Es genügt nicht, dass das Ergebnis korrekt ist; die Rohdaten müssen rückverfolgbar, unveränderbar und prüfbar sein. Die Validierung elektronischer Aufzeichnungssysteme ist daher zu einem untrennbaren Teil der Analyse geworden.

Methodengruppen in diesem Bereich

Identität und Gehalt
HPLC, UPLC, UV-Vis-Spektrophotometrie, Titration, Identitätsbestätigung mittels FTIR.
Verunreinigungen und Rückstände
Verwandte Verunreinigungen, Abbauprodukte, Restlösungsmittel (GC-Headspace), Nitrosamin-Screening.
Elementverunreinigungen
Bestimmung von Elementverunreinigungen mittels ICP-MS und ICP-OES sowie zugehörige Risikobewertung.
Physikalisch-chemisch
Freisetzung und Zerfall, Härte, Abrieb, Gleichförmigkeit der Dosiereinheiten, Wassergehalt (Karl Fischer), Partikelgröße.
Mikrobiologisch
Mikrobielle Keimzahlbestimmung, spezifizierte Mikroorganismen, Sterilität, bakterielles Endotoxin, Konservierungsmittelwirksamkeit.
Stabilität
Echtzeit- und beschleunigte Stabilitätsstudien; Photostabilität und Stabilität während der Anwendung.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Die Arzneibuchmethode ist bindend; eine alternative Methode darf nur durch Nachweis ihrer Gleichwertigkeit verwendet werden.
Ein ohne Methodenvalidierung erzeugtes Ergebnis darf nicht in einem Zulassungsdossier verwendet werden.
Die beschleunigte Stabilität ersetzt nicht die Echtzeitdaten; die Haltbarkeit wird durch Echtzeitergebnisse gestützt.
Das Freisetzungsprofil ist empfindlich gegenüber Apparatetyp, Rührgeschwindigkeit und Medium; die Bedingungen müssen im Bericht vollständig sein.
Ein Mangel an Datenintegrität führt bei einer Inspektion zu einer Nichtkonformität, selbst wenn das Ergebnis korrekt ist.
Eine Änderung der Formulierung oder des Lieferanten erfordert einen analytischen Vergleich und, falls erforderlich, eine neue Stabilitätsstudie.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

Zulassungsdossier und Chargenfreigabe
Bestimmung von Haltbarkeit und Lagerbedingungen
Methodentransfer und Methodenvalidierung
Wareneingangskontrolle von Rohstoffen der Lieferanten
Bewertung der Auswirkung einer Formulierungsänderung auf die Bioäquivalenz

Häufige Fragen zu Bioburden

Warum beeinflusst die Keimbelastung die Sterilisationsdosis?

Durch die Sterilisation wird die Anzahl der Mikroorganismen logarithmisch reduziert. Je höher die anfängliche Keimzahl ist, desto höher ist die Dosis bzw. desto länger dauert es, bis das gleiche Sterilitätssicherungsniveau (SAL) erreicht wird. Die Keimbelastung ist daher ein direkter Input für die Dosisbestimmung.

Warum wird die Rückgewinnungseffizienz gemessen?

Nicht alle Mikroorganismen können aus dem Produkt entfernt werden. Wenn der Effizienzfaktor nicht bekannt ist, erscheint die tatsächliche Keimbelastung geringer als sie ist und die Sterilisationsdosis wird als unzureichend eingestuft; Dies stellt ein direktes Sicherheitsrisiko dar.

Bioburden