Endotoxin

Was ist Endotoxin?

Der Endotoxintest misst die Menge an Lipopolysaccharid (Endotoxin), die aus der Zellwand gramnegativer Bakterien stammt. Endotoxin ist hitzebeständig: Durch die Sterilisation wird das Bakterium abgetötet, das Endotoxin wird jedoch nicht zerstört. Ein steriles Produkt kann daher dennoch pyrogen sein und muss gesondert getestet werden.

Zweck von Endotoxin

Damit soll nachgewiesen werden, dass der Endotoxingehalt in Geräten, die über den Blutkreislauf, die Gehirn-Rückenmarks-Flüssigkeit oder durch Implantation mit dem Körper in Kontakt kommen, unter dem zulässigen Grenzwert liegt.

Bei welchen Produkten wird Endotoxin angewendet?

Intravenöse Katheter und Infusionssets
Implantate
Dialysesets
Chirurgische Instrumente und Sets
Geräte, die mit Liquor cerebrospinalis in Kontakt kommen

In welchen Branchen wird Endotoxin eingesetzt?

Medizinisches GerätGesundheitspflegeArzneimittel

Normen zu Endotoxin

EP 2.6.14
USP <85>
ANSI/AAMI ST72
ISO 11737-3
ISO 11607Sterile Barriereverpackung des Endprodukts prüfen

Prüfbedingungen für Endotoxin

Verfahren: Gel-Clot-, turbidimetrische oder chromogene LAL-Methoden
Extraktion: Die körperberührenden Oberflächen des Produkts werden mit endotoxinfreiem Wasser abgesaugt
Interferenzkontrolle: Es muss sichergestellt werden, dass das Produkt den Test nicht hemmt oder verstärkt

Prüfgerät für Endotoxin

LAL-Testkits und Reagenzien
Endotoxinfreie Glaswaren
Mikroplatten-Reader (für kinetische Methoden)
Trockenofen (zur Entpyrogenisierung)
Temperaturgesteuerter Inkubator

Probenanforderungen für Endotoxin

Das endgültige, sterilisierte Produkt
Die körperberührende Oberfläche muss bekannt sein
Die Anzahl der Proben richtet sich nach dem Arzneibuch und den Chargenangaben
Die Probe muss in endotoxinfreien Behältern vorbereitet und transportiert werden

Dauer von Endotoxin

Der erste Test, einschließlich der Interferenzstudie (Hemmung/Verstärkung), dauert mehrere Tage; Routinetests sind kürzer.

Ablauf von Endotoxin

1Der Endotoxingrenzwert für das Produkt wird berechnet.
2Es wird eine Interferenzstudie durchgeführt oder es wird auf eine bestehende Studie verwiesen.
3Das Produkt wird mit endotoxinfreiem Wasser extrahiert.
4Der Extrakt wird mit dem LAL-Reagenz gemischt.
5Es wird bei der definierten Temperatur inkubiert.
6Je nach Methode werden Gerinnselbildung, Trübung oder Farbentwicklung gemessen.
7Die Endotoxinmenge wird aus der Standardkurve berechnet.

Annahmekriterien für Endotoxin

Das Akzeptanzkriterium ist der für das Produkt berechnete Endotoxingrenzwert. Dieser Grenzwert wird anhand der im Arzneibuch definierten Formel berechnet, basierend auf dem Kontaktweg des Geräts und dem Gewicht des Patienten; Bei Geräten, die mit Liquor in Kontakt kommen, liegt der Grenzwert deutlich niedriger.

Auswertung der Ergebnisse

Das Ergebnis wird mit dem berechneten Grenzwert verglichen. Wenn die Interferenzstudie nicht valide ist, kann das Ergebnis nicht interpretiert werden; Wenn das Produkt die LAL-Reaktion unterdrückt, muss ein Verdünnungsfaktor bestimmt werden.

Prüfbericht zu Endotoxin

Angewandtes Arzneibuch und Methode
Probenbeschreibung, Charge und Oberfläche
Berechneter Endotoxingrenzwert
Ergebnis der Interferenzstudie und Verdünnungsfaktor
Gemessener Endotoxinwert (EU/Gerät oder EU/ml)
Vergleich mit dem Limit

Akkreditierung

EUROLAB verfügt über eine international anerkannte Akkreditierung, die von Akkreditierungsstellen erhalten wurde, die Vertragspartei der multilateralen Anerkennungsvereinbarungen IAF und ILAC sind, gemäß ISO/IEC 17025 für Labortests, ISO/IEC 17020 für Inspektion und Überwachung sowie ISO/IEC 17021-1 und ISO/IEC 17065 für System- und Produktzertifizierung. Diese Kette stellt sicher, dass die ausgestellten Berichte und Zertifikate weltweit akzeptiert werden.

Ob dieser Test im akkreditierten Rahmen angeboten werden kann, hängt von Ihrem Produkt und der angewandten Norm ab; Da die Akkreditierung methodenbasiert erfolgt, wird der Umfang bereits im Angebotsstadium schriftlich bestätigt.

Geltungsbereich und Berechtigungen

Medikal Cihaz Testleri — Was umfasst dieser Prüfbereich?

Der folgende Abschnitt beschreibt das Gebiet, zu dem der Test Endotoxin gehört; die Bedingungen und Abnahmekriterien dieses konkreten Tests stehen in den obigen Abschnitten. Der für Ihr Produkt spezifische Umfang wird schriftlich im Angebotsstadium festgelegt.

Medizinprodukteprüfungen zeigen, dass ein Gerät für Patient und Anwender sicher ist und seine beabsichtigte Leistung beibehält. In diesem Bereich bedeutet Sicherheit nicht nur, Schaden zu vermeiden; auch das Versagen der erwarteten Funktion wird als Risiko behandelt. Ein Monitor, der einen Alarm verpasst, oder eine Pumpe, die die falsche Dosis abgibt, ist unmittelbar ein Patientensicherheitsereignis.

Im Zentrum des Fachgebiets steht das RISIKOMANAGEMENT, und das unterscheidet den Medizinbereich von anderen Sektoren. Der nach ISO 14971 durchgeführte Risikomanagementprozess legt auch fest, welche Prüfungen erforderlich sind. Die Prüfliste wird nicht aus einer Normentabelle kopiert; sie wird aus dem Verwendungszweck des Geräts, der Art und Dauer des Patientenkontakts, der Nutzungsumgebung und dem vorhersehbaren Fehlgebrauch abgeleitet und begründet.

Die Bewertung besteht aus mehreren getrennten Arbeitsbereichen, jeder mit eigenem Normensatz. Die Biokompatibilität folgt der ISO-10993-Reihe, die elektrische Gerätesicherheit der IEC-60601-Reihe, die Sterilisation ISO 11135/11137/17665, die Verpackung ISO 11607, die Software IEC 62304 und die Gebrauchstauglichkeit IEC 62366. Das Qualitätsmanagementsystem (ISO 13485) bildet den verbindenden Rahmen.

Welche Prüfungen erforderlich sind, bestimmt sich nach der KLASSE des Geräts und seiner ART DES KÖRPERKONTAKTS. Ein Produkt mit kurzem Hautkontakt und ein in den Blutkreislauf eindringendes Implantat durchlaufen nicht denselben Prüfumfang; der Umfang wird durch einen nach ISO 10993-1 erstellten biologischen Bewertungsplan festgelegt. Dieser Plan begründet schriftlich, welche Endpunkte erforderlich sind und warum andere nicht.

Verpackung und Sterilisation werden in diesem Bereich ebenso ernst genommen wie das Gerät selbst. Bei einem sterilen Gerät ist die Verpackung kein Transportbehälter, sondern die Barriere, die die Sterilität aufrechterhält; wird die Barriere durchbrochen, ist das Gerät nicht mehr steril. Verpackungsprozesse werden daher validiert, und die Haltbarkeit wird durch Echtzeit-Alterungsdaten gestützt.

Bei Geräten mit Software verlagert sich die Bewertung von der Prüfung hin zur PROZESS-Sicherung. IEC 62304 legt fest, welche Entwicklungs- und Verifizierungsschritte je nach Sicherheitsklasse der Software befolgt werden müssen; der Nachweis ist die Rückverfolgbarkeit des Entwicklungsprozesses. Nicht das Testen der Software macht sie sicher, sondern die Prozessdokumentation.

Die klinische Seite ist eine eigene Säule der technischen Dokumentation. Prüfberichte zeigen, dass das Gerät technisch sicher ist; die klinische Bewertung belegt, dass das Gerät den beabsichtigten klinischen Nutzen erbringt und das Nutzen-Risiko-Verhältnis akzeptabel ist. Keines ersetzt das andere.

Methodengruppen in diesem Bereich

Biokompatibilität
Zytotoxizität, Reizung, Hautsensibilisierung, systemische Toxizität, Hämokompatibilität, Genotoxizität und lokale Effekte nach Implantation. Die erforderlichen Endpunkte werden durch den ISO-10993-1-Plan festgelegt.
Sicherheit elektrischer Geräte
IEC 60601-1 grundlegende Sicherheit und wesentliche Leistungsmerkmale; EMV-, Alarm-, Gebrauchstauglichkeits- und Umgebungsanforderungen über die Nebennormen.
Sterilisationsvalidierung
Validierung von Sterilisationsprozessen durch Ethylenoxid, Bestrahlung oder feuchte Hitze; Bioburden- und Sterilitätssicherheitsniveau-Studien.
Verpackung
Integrität des sterilen Barrieresystems, Siegelfestigkeit, Vertriebssimulation und Haltbarkeitsstudien.
Mikrobiologische Prüfungen
Bioburden-Bestimmung, Sterilitätsprüfung, bakterielles Endotoxin und, falls erforderlich, Trägervalidierungsstudien.
Software und Gebrauchstauglichkeit
IEC-62304-Lebenszyklusnachweise und auf Bedienfehler fokussierte Bewertung gemäß IEC 62366.

Häufig verwechselt in diesem Bereich

Zytotoxizität allein ist kein Beweis für Biokompatibilität; Der erforderliche Satz an Endpunkten wird gemäß ISO 10993-1 ermittelt und begründet.
Ein ISO-13485-Zertifikat verleiht keine CE-Kennzeichnung; die Klassifizierung nach MDR, die technische Dokumentation und das Verfahren der Benannten Stelle laufen gesondert.
Die beschleunigte Alterung ersetzt nicht die Echtzeitalterung; Eine Haltbarkeitsaussage wird durch Echtzeitdaten gestützt.
Ein Materialwechsel (Lieferant, Pigment, Sterilisationsmethode) kann eine Wiederholung der biologischen Beurteilung erfordern; er ist keine stille Änderung.
Eine Bewertung ohne die Neben- und Sondernormen zu IEC 60601-1 ist unvollständig; welche -1-x- und -2-x-Normen angewendet wurden, muss im Bericht erscheinen.
In-vitro-Diagnostika fallen unter die IVDR und nicht die MDR, und Laborgeräte liegen oft im Bereich der IEC 61010-1.

Welche Entscheidungen diese Ergebnisse unterstützen

MDR/IVDR-Technische Dokumentation und Bewertung durch die Benannte Stelle
Abschluss des Plans zur biologischen Beurteilung
Sterilisations- und Verpackungsvalidierung
Bestimmung von Haltbarkeit und Lagerbedingungen
Festlegung des Umfangs der Neubewertung nach einer Konstruktionsänderung

Häufige Fragen zu Endotoxin

Mein Produkt ist steril – warum ist ein Endotoxintest erforderlich?

Endotoxin ist hitzebeständig; Obwohl die Sterilisation das Bakterium abtötet, wird Endotoxin, ein Zellwandrückstand, nicht abgebaut. Ein steriles Produkt kann daher immer noch eine pyrogene Reaktion hervorrufen und Endotoxin muss separat gemessen werden.

Wie wird der Endotoxingrenzwert bestimmt?

Sie wird anhand der im Arzneibuch definierten Formel berechnet, basierend auf dem Kontaktweg des Geräts und der zulässigen Dosis. Für Geräte, die mit Liquor cerebrospinalis in Kontakt kommen, liegt der Grenzwert deutlich niedriger; die Berechnung muss im Bericht ausgewiesen werden.