شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل چیست؟
تعداد کل باکتری‌های مزوفیل هوازی تعداد کل باکتری‌های زنده را نشان می‌دهد که می‌توانند در مواد غذایی در محیط اکسیژن‌دار و در دمای متوسط رشد کنند. به دنبال پاتوژن خاصی نمی گردد. میزان بار میکروارگانیسم زنده در محصول را اندازه گیری می کند. نتیجه به صورت واحدهای تشکیل دهنده کلنی (cfu/g یا cfu/mL) گزارش می شود.
هدف شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
هدف نظارت بر کیفیت مواد خام، بهداشت تولید و اثربخشی زنجیره سرد است. TAMB بالا به تنهایی به این معنی نیست که محصول باعث بیماری می شود. با این حال، این اولین نشانه ای است که نشان می دهد مشکلی در زنجیره بهداشتی وجود دارد و به طور مستقیم بر ماندگاری تأثیر می گذارد.
شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل بر چه محصولاتی اعمال می‌شود؟
- شیر و لبنیات
- گوشت، مرغ و غذاهای دریایی
- غذاهای آماده و غذاهای منجمد
- آرد، ادویه جات و غذاهای خشک
- نوشیدنی و آب آشامیدنی
شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- ISO 4833-1 (روش صفحه ریخته گری، 30 درجه سانتیگراد)
- ISO 4833-2 (روش صفحه اسمیر)
- ISO 7218 (قوانین عمومی برای آزمایشات میکروبیولوژیکی)
- سری ISO 6887 (تهیه و رقیق سازی نمونه)
شرایط شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- روش
- صفحه ریخته گری ISO 4833-1 یا صفحه پخش ISO 4833-2
- محیط کشت
- Plate Count Agar (PCA)
- جوجه کشی
- در شرایط هوازی در دمای 30 درجه سانتی گراد
- سرشماری
- شمارش کلنی از صفحات در محدوده قابل شمارش و محاسبه با ضریب رقت
تجهیزات شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- کابینت ایمنی زیستی کلاس II
- انکوباتورهای کنترل دما
- کیسه های معده (هموژنایزر پریستالتیک) و کیسه های استریل
- اتوکلاو و استریل کننده هوای خشک
- دستگاه و میکروسکوپ شمارش کلنی
الزامات نمونه برای شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- نمونه باید در بسته‌بندی اصلی و باز نشده ارسال شود.
- محصولاتی که نیاز به زنجیر سرد دارند باید با کولر و بدون پاره شدن زنجیره تحویل شوند.
- قوانین نمونه گیری آسپتیک باید رعایت شود. ظرف باید استریل باشد.
- اطلاعات دسته، تاریخ تولید و تاریخ انقضا باید همراه با نمونه گزارش شود.
- مقدار مورد نیاز برای تجزیه و تحلیل بسته به نوع محصول متفاوت است. تایید باید قبل از حمل و نقل دریافت شود.
مدت شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
دوره نهفتگی در استاندارد روش تعریف شده و چندین روز طول می کشد. کل زمان، از جمله آماده سازی نمونه، رقیق سازی و گزارش، معمولا در کمتر از یک هفته کامل می شود.
روش اجرای شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- 1نمونه در شرایط آسپتیک وزن شده و با مایع رقیق کننده همگن می شود.
- 2رقت های اعشاری بر اساس ISO 6887 تهیه می شوند.
- 3کاشت در ظروف پتری بدون هر رقیق انجام می شود و بستر ریخته می شود.
- 4صفحات در دما و زمان معین انکوبه می شوند.
- 5کلنی ها بر روی صفحات در محدوده قابل شمارش شمارش می شوند.
- 6نتیجه بر حسب cfu/g یا cfu/mL با ضریب رقت محاسبه می شود.
معیارهای پذیرش شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
قانون، نه روش، تعیین می کند که آیا نتیجه مناسب تلقی می شود یا خیر. بیانیه مربوطه کدکس مواد غذایی ترکیه، اتحادیه اروپا 2073/2005 و 1881/2006 و مشخصات شرکت خریدار بسته به گروه محصول، محدودیت های متفاوتی را تعریف می کند. این گزارش مقدار اندازه گیری شده را ارائه می دهد و محدودیت را از قوانین قابل اجرا می گیرد.
ارزیابی نتایج
نتیجه با معیار میکروبیولوژیکی که گروه محصول مشمول آن است مقایسه می شود. ارزیابی معمولاً بر اساس یک نمونه واحد نیست، بلکه بر اساس مجموعه‌ای از نمونه‌های گرفته شده از همان قطعه و یک طرح دو کلاسه/سه کلاسه است.
گزارش شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
- توضیحات نمونه، اطلاعات دسته/لات و شرایط ورود
- روش نمونه برداری (در صورت نمونه گیری در آزمایشگاه)
- روش تحلیل کاربردی و استاندارد مرجع
- تاریخ آنالیز و شرایط جوجه کشی در صورت وجود
- نتیجه و واحد آن
- عدم قطعیت اندازه گیری (در صورت درخواست)
- بیانیه ای مبنی بر اینکه نتیجه فقط برای نمونه ارسال شده برای آزمایش اعمال می شود
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- مقررات ضوابط میکروبیولوژیکی کدکس مواد غذایی ترکیه
- اتحادیه اروپا 2073/2005 — معیارهای میکروبیولوژیکی برای مواد غذایی
- قانون شماره ۵۹۹۶ درباره خدمات دامپزشکی، سلامت گیاه، غذا و خوراک دام
آزمون مواد غذایی — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش می‌دهد؟
بخش زیر حوزه‌ای را توصیف می‌کند که آزمون شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخش‌های بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت به‌صورت مکتوب مشخص می‌شود.
آزمون‌های غذایی نشان می‌دهند که یک محصول برای مصرف ایمن است و همان چیزی را دارد که روی برچسبش نوشته شده. این خانواده در سه محور کار می‌کند: ایمنی میکروبیولوژیک، ایمنی شیمیایی و ترکیب تغذیه‌ای. هر سه به زیرساخت آزمایشگاهی متفاوت، مجموعه روش متفاوت و زمان تصمیم‌گیری متفاوتی نیاز دارند.
بارزترین ویژگی این حوزه فشار زمانی است. یک نمونه فولادی می‌تواند روی قفسه منتظر بماند؛ اما نمونه شیر خام یا گوشت تازه نمی‌تواند. زمان نمونه‌برداری، دمای حمل‌ونقل و مدت رسیدن به آزمایشگاه مستقیماً اعتبار نتیجه را تعیین می‌کنند. به همین دلیل، در میکروبیولوژی غذایی ثبت زنجیره سرد بخشی جدایی‌ناپذیر از گزارش آزمون است.
در سمت میکروبیولوژیک دو پرسش متفاوت وجود دارد که نباید با هم اشتباه گرفته شوند. شناسایی یک پاتوژن پرسشی کیفی است: آیا سالمونلا در نمونه وجود دارد یا نه؟ شمارش میکروارگانیسم‌های شاخص پرسشی کمی و شاخصی از بهداشت تولید است. نبود پاتوژن در یک محصول نشان‌دهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ اگر شمارش کل هوازی‌های مزوفیل بالا باشد، در فرآیند مشکلی وجود دارد.
در سمت شیمیایی، باقیمانده آفت‌کش‌ها، مایکوتوکسین‌ها، فلزات سنگین، افزودنی‌ها، باقیمانده داروهای دامپزشکی و آلاینده‌های فرآیندی (اکریل‌آمید، فوران، PAH) اندازه‌گیری می‌شوند. روش‌های چندباقیمانده در این حوزه (LC-MS/MS و GC-MS/MS مبتنی بر QuEChERS) می‌توانند صدها ماده فعال را در یک تحلیل غربالگری کنند؛ حدود برای هر جفت محصول-ماده جداگانه تعریف می‌شوند.
در سمت ترکیب، پروتئین، چربی، رطوبت، خاکستر، فیبر، نمایه قند، ترکیب اسید چرب و محتوای ویتامین و مواد معدنی تعیین می‌شود. این مقادیر مبنای بیانیه تغذیه‌ای روی برچسب هستند و بازه‌های تلورانس در مقررات تعریف شده‌اند - تفاوت بین مقدار اعلام‌شده و مقدار اندازه‌گیری‌شده باید در این تلورانس باقی بماند.
هیچ نشان CEای برای مواد غذایی وجود ندارد و همین امر نحوه کار این حوزه را شکل می‌دهد. انطباق از طریق اجرای یک سیستم ایمنی غذایی مبتنی بر HACCP، رعایت قوانین برچسب‌گذاری و عدم تجاوز از حدود آلاینده، باقیمانده و میکروبیولوژیک نشان داده می‌شود. نتیجه آزمون مدرکی برای یک گواهی نیست بلکه مدرکی برای یک سیستم کارآمد است.
مدیریت آلرژن اهمیت ویژه‌ای دارد. وجود آلرژن اعلام‌نشده در یک محصول یکی از شایع‌ترین دلایل فراخوان مواد غذایی است. تحلیل در اینجا همراه با اعتبارسنجی تمیزکاری انجام می‌شود: نشان داده می‌شود که خط تولید پس از یک دوره تولید حاوی آلرژن به‌اندازه کافی تمیز شده و خطر آلودگی متقاطع تحت کنترل است.
طرح‌های داوطلبانه در این حوزه عملاً اجباری شده‌اند. زنجیره‌های خرده‌فروشی از تأمین‌کنندگان خود می‌خواهند گواهی تحت یک طرح تأییدشده توسط GFSI (مانند BRCGS، IFS، FSSC 22000) داشته باشند؛ بدون آن، رسیدن به قفسه عملاً غیرممکن است.
گروه‌های روش در این حوزه
شناسایی پاتوژن
شناسایی سالمونلا، لیستریا مونوسیتوژنز، کمپیلوباکتر، کرونوباکتر و ای‌کولای تولیدکننده توکسین شیگا؛ به روش‌های کشت و مولکولی.
شمارش شاخص‌ها
شمارش کل هوازی‌های مزوفیل، انتروباکتریاسه، کلیفرم و ای‌کولای، استافیلوکوک کواگولاز مثبت، مخمر و کپک، باکتری اسید لاکتیک، کلستریدیای احیاکننده سولفیت.
باقیمانده آفت‌کش و دامپزشکی
غربالگری چندباقیمانده با LC-MS/MS و GC-MS/MS همراه با استخراج QuEChERS.
مایکوتوکسین و آلاینده‌ها
آفلاتوکسین‌ها، اوکراتوکسین A، دی‌اکسی‌نیوالنول، پاتولین؛ فلزات سنگین (ICP-MS)، اکریل‌آمید و ترکیبات PAH.
ترکیب تغذیه‌ای
پروتئین کجلدال، نمایه چربی و اسید چرب، رطوبت، خاکستر، فیبر غذایی، نمایه قند، تحلیل ویتامین و مواد معدنی.
آلرژن و اصالت
تحلیل آلرژن گلوتن، شیر، تخم‌مرغ، آجیل و سویا؛ روش‌های مولکولی برای شناسایی گونه و کشف تقلب.
موارد رایج اشتباه‌گرفته‌شده در این حوزه
- نمونه‌برداری نیمی از نتیجه است. نمونه‌ای که در دمای نادرست حمل شده یا تأخیر داشته حتی اگر در آزمایشگاه به‌درستی تحلیل شود نتیجه نامعتبر می‌دهد.
- نبود پاتوژن نشان‌دهنده خوب بودن بهداشت نیست؛ شمارش شاخص‌ها اطلاعات جداگانه‌ای می‌دهد و این دو با هم خوانده می‌شوند.
- نتیجه نمونه‌ای که از یک محموله گرفته شده تنها در صورتی قابل تعمیم به کل محموله است که طرح نمونه‌برداری به‌صورت آماری تنظیم شده باشد.
- حدود در مقررات جداگانه بر اساس گروه محصول تعریف می‌شوند و به‌طور منظم به‌روزرسانی می‌شوند؛ تصمیم انطباق مبتنی بر جدول حدود قدیمی ممکن است نادرست باشد.
- در صادرات، حدود کشور مقصد ممکن است با حدود اتحادیه اروپا متفاوت باشد؛ یک محصول واحد ممکن است در یک بازار منطبق و در بازار دیگر نامنطبق باشد.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی می‌کنند
- راستی‌آزمایی طرح HACCP و پایش فرآیند
- مبنای بیانیه تغذیه‌ای و اطلاعات آلرژن روی برچسب
- گواهی بهداشتی پیش از صادرات و انطباق با حدود بازار مقصد
- کنترل پذیرش بر اساس تأمین‌کننده و محموله
- مطالعات عمر قفسه و تعیین شرایط نگهداری
- تولید مستندات برای ممیزی‌های طرح‌های تأییدشده GFSI
تست های مرتبط
پرسش‌های متداول درباره شمارش کلی باکتری هوازی مزوفیل
آیا TAMB بالا به معنای معیوب بودن محصول است؟
نه مستقیم. TAMB یک شاخص بهداشتی است. مقدار بالا نشان دهنده فساد قریب الوقوع یا مشکلات بهداشت تولید است، اما نشان دهنده وجود عوامل بیماری زا نیست. تجزیه و تحلیل های جداگانه برای پاتوژن انجام می شود.
آیا برای محصولات تخمیر شده نیز بررسی می شود؟
از آنجایی که محصولات تخمیر شده حاوی کشت های زنده استارتر هستند، TAMB به طور طبیعی بالا است و به تنهایی قابل توجه نیست. در این محصولات سایر پارامترها مانند کلیفرم، مخمر و کپک به عنوان شاخص های بهداشتی ارجحیت دارند.