Endotoxin چیست؟
آزمایش اندوتوکسین مقدار لیپوپلی ساکارید (اندوتوکسین) منشاء گرفته از دیواره سلولی باکتری های گرم منفی را اندازه گیری می کند. اندوتوکسین در برابر حرارت مقاوم است: عقیم سازی باکتری را می کشد اما اندوتوکسین را از بین نمی برد. بنابراین یک محصول استریل همچنان می تواند تب زا باشد و باید جداگانه آزمایش شود.
هدف Endotoxin
هدف این است که نشان دهیم سطح اندوتوکسین در دستگاه‌هایی که از طریق جریان خون، مایع مغزی نخاعی یا کاشت با بدن تماس دارند، کمتر از حد مجاز است.
Endotoxin بر چه محصولاتی اعمال می‌شود؟
- کاتترها و ست های انفوزیون داخل وریدی
- ایمپلنت ها
- ست های دیالیز
- ابزار و مجموعه های جراحی
- دستگاه های در تماس با مایع مغزی نخاعی
Endotoxin در چه صنایعی کاربرد دارد؟
استانداردهای مرتبط با Endotoxin
- EP 2.6.14
- USP <85>
- ANSI/AAMI ST72
- ISO 11737-3
- ISO 11607بسته بندی مانع استریل محصول نهایی تست کنید
شرایط Endotoxin
- روش
- روش های ژل لخته، کدورت سنجی یا LAL کروموژنیک
- استخراج
- سطوح تماس این محصول با بدن با آب عاری از اندوتوکسین استخراج می شود
- کنترل تداخل
- باید تأیید شود که محصول آزمایش را مهار یا تقویت نمی کند
تجهیزات Endotoxin
- کیت ها و معرف های تست LAL
- ظروف شیشه ای بدون اندوتوکسین
- میکروپلیت خوان (برای روش های جنبشی)
- اجاق با حرارت خشک (برای دفع هوا)
- دستگاه جوجه کشی با کنترل دما
الزامات نمونه برای Endotoxin
- محصول نهایی و استریل شده
- سطح تماس با بدن باید مشخص باشد
- تعداد نمونه ها با توجه به فارمکوپه و اطلاعات دسته ای تعیین می شود
- نمونه باید در ظروف عاری از اندوتوکسین تهیه و حمل شود
مدت Endotoxin
آزمایش اولیه، از جمله مطالعه تداخل (مهار/افزایش)، چند روز طول می کشد. تست های معمول کوتاه تر هستند.
روش اجرای Endotoxin
- 1حد اندوتوکسین برای محصول محاسبه می شود.
- 2یک مطالعه تداخل انجام می شود یا به یک مطالعه موجود اشاره می شود.
- 3این محصول با آب عاری از اندوتوکسین استخراج می شود.
- 4عصاره با معرف LAL مخلوط می شود.
- 5در دمای تعریف شده انکوبه می شود.
- 6تشکیل لخته، کدورت یا توسعه رنگ بسته به روش اندازه گیری می شود.
- 7مقدار اندوتوکسین از منحنی استاندارد محاسبه می شود.
معیارهای پذیرش Endotoxin
معیار پذیرش حد اندوتوکسین محاسبه شده برای محصول است. این حد با استفاده از فرمول تعریف شده در فارماکوپه، بر اساس مسیر تماس دستگاه و وزن بیمار محاسبه می شود. این محدودیت برای دستگاه هایی که با مایع مغزی نخاعی در تماس هستند به طور قابل توجهی کمتر است.
ارزیابی نتایج
نتیجه با حد محاسبه شده مقایسه می شود. اگر مطالعه تداخل معتبر نباشد، نتیجه قابل تفسیر نیست. در جایی که محصول واکنش LAL را سرکوب می کند، ضریب رقت باید تعیین شود.
گزارش Endotoxin
- فارماکوپه و روش کاربردی
- شرح نمونه، دسته و مساحت سطح
- حد اندوتوکسین محاسبه شده
- نتیجه مطالعه تداخل و فاکتور رقت
- مقدار اندوتوکسین اندازه گیری شده (EU/دستگاه یا EU/mL)
- مقایسه با حد
اعتباربخشی
EUROLAB دارای اعتبار شناخته شده بین المللی است که از نهادهای اعتباربخشی طرف قراردادهای شناسایی چندجانبه IAF و ILAC، تحت ISO/IEC 17025 برای تست های آزمایشگاهی، ISO/IEC 17020 برای بازرسی و نظارت، و ISO/IEC 17021-1 و سیستم گواهی محصول ISO/IEC. این زنجیره تضمین می کند که گزارش ها و گواهی های صادر شده در سراسر جهان پذیرفته می شوند.
اینکه آیا این آزمون می تواند در محدوده معتبر ارائه شود به محصول شما و استاندارد اعمال شده بستگی دارد. از آنجایی که اعتبارسنجی مبتنی بر روش است، دامنه به صورت کتبی در مرحله نقل قول تأیید می شود.
محدوده و مجوزهامقررات مرتبط
- MDR (EU) 2017/745
- الزامات فارماکوپه
Medikal Cihaz Testleri — این حوزه آزمون چه چیزی را پوشش می‌دهد؟
بخش زیر حوزه‌ای را توصیف می‌کند که آزمون Endotoxin به آن تعلق دارد؛ شرایط و معیارهای پذیرش این آزمون خاص در بخش‌های بالا آمده است. دامنه ویژه محصول شما در مرحله پیشنهاد قیمت به‌صورت مکتوب مشخص می‌شود.
آزمون‌های تجهیزات پزشکی نشان می‌دهد که دستگاه برای بیمار و کاربر ایمن است و عملکرد موردنظر خود را حفظ می‌کند. در این حوزه ایمنی فقط به معنای پرهیز از آسیب نیست؛ ناتوانی دستگاه در انجام عملکرد موردانتظار نیز به‌عنوان یک ریسک در نظر گرفته می‌شود. از دست دادن آلارم توسط یک مانیتور یا تجویز دوز نادرست توسط یک پمپ مستقیماً یک رویداد ایمنی بیمار است.
در مرکز این حوزه مدیریت ریسک قرار دارد و این همان چیزی است که پزشکی را از سایر بخش‌ها متمایز می‌کند. فرآیند مدیریت ریسک که تحت ISO 14971 اجرا می‌شود همچنین تعیین می‌کند کدام آزمون‌ها لازم است. فهرست آزمون از یک جدول استاندارد کپی نمی‌شود؛ بلکه بر اساس کاربرد موردنظر دستگاه، ماهیت و مدت تماس با بیمار، محیط استفاده و سوءاستفاده قابل‌پیش‌بینی استخراج و توجیه می‌شود.
ارزیابی از چندین حوزه کاری جداگانه تشکیل شده که هرکدام مجموعه استاندارد خاص خود را دارند. زیست‌سازگاری تحت سری ISO 10993، ایمنی الکتریکی دستگاه تحت سری IEC 60601، استریل‌سازی تحت ISO 11135/11137/17665، بسته‌بندی تحت ISO 11607، نرم‌افزار تحت IEC 62304 و قابلیت استفاده تحت IEC 62366 انجام می‌شود. سیستم کیفیت (ISO 13485) چارچوبی است که این‌ها را به هم پیوند می‌دهد.
اینکه کدام آزمون‌ها لازم است بر اساس رده دستگاه و نحوه تماس آن با بدن تعیین می‌شود. محصولی با تماس کوتاه با پوست و یک ایمپلنت که وارد جریان خون می‌شود مجموعه آزمون یکسانی را طی نمی‌کنند؛ دامنه توسط یک طرح ارزیابی زیستی تهیه‌شده طبق ISO 10993-1 تعیین می‌شود. این طرح به‌صورت مکتوب توجیه می‌کند کدام نقاط پایانی لازم است و چرا بقیه لازم نیستند.
بسته‌بندی و استریل‌سازی در این حوزه به‌اندازه خود دستگاه جدی گرفته می‌شود. برای یک دستگاه استریل، بسته‌بندی یک ظرف حمل‌ونقل نیست بلکه مانعی است که استریل بودن را حفظ می‌کند؛ اگر این مانع شکسته شود، دستگاه دیگر استریل نیست. از این رو فرآیندهای بسته‌بندی اعتبارسنجی می‌شوند و عمر قفسه با داده‌های پیرسازی در زمان واقعی پشتیبانی می‌شود.
برای دستگاه‌های حاوی نرم‌افزار، ارزیابی از آزمون به سمت تضمین فرآیند تغییر می‌کند. IEC 62304 مشخص می‌کند بر اساس رده ایمنی نرم‌افزار چه مراحل توسعه و راستی‌آزمایی باید دنبال شود؛ مدرک آن ردیابی‌پذیری فرآیند توسعه است. آزمودن نرم‌افزار آن را ایمن نمی‌کند - سابقه فرآیند این کار را می‌کند.
جنبه بالینی ستون جداگانه‌ای از پرونده فنی است. گزارش‌های آزمون نشان می‌دهند دستگاه از نظر فنی ایمن است؛ ارزیابی بالینی ثابت می‌کند دستگاه منفعت بالینی مورد نظر را فراهم می‌کند و توازن منفعت-ریسک قابل قبول است. هیچ‌کدام جایگزین دیگری نمی‌شود.
گروه‌های روش در این حوزه
زیست‌سازگاری
سیتوتوکسیسیته، تحریک، حساسیت پوستی، سمیت سیستمیک، سازگاری با خون، ژنوتوکسیسیته و اثرات موضعی پس از ایمپلنت. نقاط پایانی لازم توسط طرح ISO 10993-1 تعیین می‌شود.
ایمنی دستگاه الکتریکی
IEC 60601-1 ایمنی پایه و عملکرد اساسی؛ الزامات EMC، هشدار، قابلیت استفاده و محیطی از طریق استانداردهای جانبی.
اعتبارسنجی استریلیزاسیون
اعتبارسنجی فرآیندهای استریلیزاسیون با اکسید اتیلن، پرتودهی یا حرارت مرطوب؛ مطالعات بار میکروبی و سطح تضمین استریلیتی.
بسته بندی
یکپارچگی سیستم سد استریل، استحکام درزبندی، شبیه‌سازی توزیع و مطالعات عمر قفسه.
آزمون‌های میکروبیولوژیک
تعیین بار میکروبی، آزمون استریلیتی، اندوتوکسین باکتریایی و در صورت لزوم مطالعات اعتبارسنجی حامل.
نرم‌افزار و قابلیت استفاده
شواهد چرخه عمر IEC 62304 و ارزیابی متمرکز بر خطای کاربری طبق IEC 62366.
موارد رایج اشتباه‌گرفته‌شده در این حوزه
- سمیت سلولی به تنهایی دلیلی بر زیست سازگاری نیست. مجموعه مورد نیاز از نقاط پایانی بر اساس ISO 10993-1 تعیین و توجیه می شود.
- گواهی ISO 13485 نشان CE اعطا نمی‌کند؛ طبقه‌بندی تحت MDR، پرونده فنی و فرآیند نهاد اعلام‌شده جداگانه انجام می‌شود.
- پیری سریع جایگزین پیری بلادرنگ نمی شود. ادعای ماندگاری توسط داده های زمان واقعی پشتیبانی می شود.
- تغییر ماده (تأمین‌کننده، پیگمنت، روش استریل‌سازی) ممکن است نیازمند تکرار ارزیابی زیستی باشد؛ این یک تغییر خاموش نیست.
- ارزیابی بدون استانداردهای جانبی و خاص IEC 60601-1 ناقص است؛ باید در گزارش مشخص شود کدام استانداردهای -1-x و -2-x اعمال شده‌اند.
- دستگاه‌های تشخیص آزمایشگاهی تحت IVDR قرار دارند نه MDR، و تجهیزات آزمایشگاهی اغلب در حوزه IEC 61010-1 هستند.
این نتایج از کدام تصمیم پشتیبانی می‌کنند
- پرونده فنی MDR/IVDR و ارزیابی نهاد اعلام‌شده
- تکمیل طرح ارزیابی زیستی
- اعتبارسنجی استریلیزاسیون و بسته‌بندی
- تعیین عمر قفسه و شرایط نگهداری
- تعیین دامنه ارزیابی مجدد پس از تغییر طراحی
تست های مرتبط
پرسش‌های متداول درباره Endotoxin
محصول من استریل است - چرا آزمایش اندوتوکسین لازم است؟
اندوتوکسین در برابر حرارت مقاوم است. اگرچه عقیم سازی باکتری را از بین می برد، اما اندوتوکسین را که باقیمانده دیواره سلولی است، تجزیه نمی کند. بنابراین یک محصول استریل هنوز هم می تواند باعث واکنش تب زایی شود و اندوتوکسین باید جداگانه اندازه گیری شود.
حد اندوتوکسین چگونه تعیین می شود؟
با استفاده از فرمول تعریف شده در فارماکوپه، بر اساس مسیر تماس دستگاه و دوز مجاز محاسبه می شود. برای دستگاه هایی که با مایع مغزی نخاعی در تماس هستند، این حد بسیار کمتر است. محاسبه باید در گزارش نشان داده شود.