Τι είναι η Assay;
Η ανάλυση μετρά την ποσότητα της δραστικής ουσίας στο προϊόν. Η HPLC είναι η πιο κοινή μέθοδος. μπορούν επίσης να χρησιμοποιηθούν τιτρομετρικές ή φασματοφωτομετρικές μέθοδοι ανά μονογραφία. Το αποτέλεσμα εκφράζεται ως ποσοστό του δηλωμένου περιεχομένου.
Σκοπός της Assay
Ο σκοπός είναι να επαληθευτεί ότι το προϊόν περιέχει τη δηλωμένη δόση. Η απόκλιση της δόσης δημιουργεί άμεσο κίνδυνο τόσο για την αποτελεσματικότητα όσο και για την ασφάλεια.
Σε ποια προϊόντα εφαρμόζεται η Assay;
- Δισκία, κάψουλες και κουφέτα
- Σιρόπια, εναιωρήματα και σταγόνες
- Ενέσιμα διαλύματα
- Κρέμες, τζελ και αλοιφές
- Δραστικά φαρμακευτικά συστατικά
Σε ποιους τομείς χρησιμοποιείται η Assay;
Πρότυπα σχετικά με τη Assay
- Ph. Eur. 2.2.29 (υγρή χρωματογραφία)
- Ph. Eur. 2.2.46 (τεχνικές χρωματογραφικού διαχωρισμού)
- USP <621> (χρωματογραφία)
- ICH Q2(R2) (επικύρωση αναλυτικών διαδικασιών)
- Σχετικές μονογραφίες προϊόντων
Συνθήκες της Assay
- Καταλληλότητα συστήματος
- Τα κριτήρια καταλληλότητας συστήματος στη μονογραφία πρέπει να πληρούνται σε κάθε εκτέλεση
- Πρότυπο αναφοράς
- Φαρμακοποιία ή πιστοποιημένο πρότυπο εργασίας
- Προετοιμασία δείγματος
- Η εκχύλιση και η αραίωση ορίζονται στη μονογραφία
Εξοπλισμός για τη Assay
- HPLC / UPLC (με ανιχνευτή DAD ή UV)
- Αυτόματος τιτλοδοτητής
- Φασματοφωτόμετρο UV/Vis
- Αναλυτικό υπόλοιπο (0,00001 g)
- Λουτρό και φυγόκεντρος υπερήχων
Απαιτήσεις δείγματος για τη Assay
- Ο αριθμός των μονάδων που καθορίζονται στη μονογραφία (δισκίο, κάψουλα κ.λπ.)
- Πρέπει να παρέχονται ο αριθμός παρτίδας και η δηλωμένη δόση
- Το δείγμα πρέπει να αποσταλεί στην αρχική του συσκευασία
- Πρέπει να παρέχονται τυπικές πληροφορίες αναφοράς
Διάρκεια της Assay
Η χρωματογραφική δοκιμασία, μαζί με την προετοιμασία του δείγματος και την καταλληλότητα του συστήματος, διαρκεί αρκετές εργάσιμες ημέρες.
Διαδικασία της Assay
- 1Η μέθοδος και οι προϋποθέσεις στη μονογραφία διαμορφώνονται.
- 2Παρασκευάζεται το πρότυπο διάλυμα αναφοράς.
- 3Εκτελείται μια εκτέλεση καταλληλότητας συστήματος και επαληθεύονται τα κριτήρια.
- 4Το δείγμα προετοιμάζεται σύμφωνα με τη μονογραφία.
- 5Πραγματοποιείται χρωματογραφική ή τιτρομετρική μέτρηση.
- 6Η περιεκτικότητα σε δραστική ουσία υπολογίζεται ως ποσοστό της δηλωμένης τιμής.
Κριτήρια αποδοχής της Assay
Το κριτήριο αποδοχής δεν δίνεται σε αυτή τη σελίδα: για κάθε δραστική ουσία και κάθε προϊόν, το όριο προέρχεται από τη σχετική μονογραφία της φαρμακοποιίας ή την εγκεκριμένη προδιαγραφή στον φάκελο της άδειας κυκλοφορίας. Το γενικό κεφάλαιο της φαρμακοποιίας ορίζει τη μέθοδο. η μονογραφία θέτει το όριο.
Αξιολόγηση Αποτελεσμάτων
Ένα αποτέλεσμα που προκύπτει χωρίς να πληρούνται τα κριτήρια καταλληλότητας του συστήματος δεν είναι έγκυρο. Αυτά τα κριτήρια αποδεικνύουν ότι η μέθοδος λειτούργησε σωστά εκείνη την ημέρα. Το αποτέλεσμα της ανάλυσης από μόνο του δεν είναι επίσης αρκετό: η ομοιομορφία του περιεχομένου και η δοκιμή διάλυσης δείχνουν ότι κάθε μονάδα του προϊόντος παρέχει τη σωστή δόση.
Έκθεση της Assay
- Ταυτοποίηση δείγματος, παρτίδα και δηλωμένη δόση
- Μονογραφία και μέθοδοι που εφαρμόζονται
- Αποτελέσματα καταλληλότητας συστήματος
- Αποτέλεσμα ανάλυσης (% των δηλωθέντων)
- Χρωματογραφήματα και υπολογισμοί
Διαπίστευση
Η EUROLAB κατέχει διεθνώς αναγνωρισμένη διαπίστευση που λαμβάνεται από φορείς διαπίστευσης που συμμετείχαν στις συμφωνίες πολυμερούς αναγνώρισης IAF και ILAC, σύμφωνα με το ISO/IEC 17025 για εργαστηριακές δοκιμές, το ISO/IEC 17020 για την επιθεώρηση και την επιτήρηση και το ISO/IEC 17021-1 και το σύστημα πιστοποίησης προϊόντων ISO/IEC. Αυτή η αλυσίδα διασφαλίζει ότι οι εκθέσεις και τα πιστοποιητικά που εκδίδονται γίνονται αποδεκτά παγκοσμίως.
Το εάν αυτή η δοκιμή μπορεί να προσφερθεί εντός αναγνωρισμένου πεδίου εξαρτάται από το προϊόν σας και το πρότυπο που εφαρμόζεται. Δεδομένου ότι η διαπίστευση βασίζεται στη μέθοδο, το πεδίο εφαρμογής επιβεβαιώνεται γραπτώς στο στάδιο της προσφοράς.
Πεδίο εφαρμογής και εξουσιοδοτήσειςΣχετικοί Κανονισμοί
- Οδηγία 2001/83/ΕΚ για τα φαρμακευτικά προϊόντα για ανθρώπινη χρήση
- Οδηγός GMP (EudraLex τόμος 4)
Φαρμακευτική Ανάλυση — Τι καλύπτει αυτός ο τομέας δοκιμών;
Η παρακάτω ενότητα περιγράφει τον τομέα στον οποίο ανήκει η δοκιμή Assay· οι συνθήκες και τα κριτήρια αποδοχής αυτής της συγκεκριμένης δοκιμής δίνονται στις παραπάνω ενότητες. Το πεδίο εφαρμογής που αφορά το προϊόν σας επιβεβαιώνεται εγγράφως στο στάδιο της προσφοράς.
Η φαρμακευτική ανάλυση προσδιορίζει την ταυτότητα, την καθαρότητα, την ποσότητα και τη συμπεριφορά της δραστικής ουσίας του φαρμάκου και του τελικού προϊόντος. Αυτό που διακρίνει αυτόν τον τομέα από τους άλλους είναι ότι οι μέθοδοι ορίζονται σε μεγάλο βαθμό στις ΦΑΡΜΑΚΟΠΟΙΙΕΣ: τόσο η Ευρωπαϊκή Φαρμακοποιία (Ph. Eur.) όσο και η Φαρμακοποιία των Ηνωμένων Πολιτειών (USP) παρέχουν τόσο τη μέθοδο όσο και το πλαίσιο αποδοχής.
Ο δεσμευτικός χαρακτήρας της μεθόδου της φαρμακοποιίας καθορίζει τον τρόπο λειτουργίας του τομέα. Ενώ σε άλλους κλάδους το εργαστήριο μπορεί να επιλέξει κατάλληλη μέθοδο, εδώ ισχύει η μέθοδος που ορίζεται στη μονογραφία· αν πρόκειται να χρησιμοποιηθεί εναλλακτική μέθοδος, πρέπει να αποδειχθεί η ισοδυναμία της. Αυτό εξασφαλίζει ότι τα αποτελέσματα είναι συγκρίσιμα παγκοσμίως.
Οι αναλύσεις διεξάγονται σε διάφορες ομάδες. Ο προσδιορισμός ταυτότητας και ποσότητας (HPLC, UV, τιτλοδότηση) δείχνει τι είναι το προϊόν και πόση δραστική ουσία περιέχει. Το προφίλ ακαθαρσιών και τα υπολείμματα διαλυτών εντοπίζουν ανεπιθύμητες ενώσεις που προέρχονται από τη διαδικασία παραγωγής. Οι στοιχειακές ακαθαρσίες αφορούν μέταλλα που προέρχονται από καταλύτες και εξοπλισμό. Η συμπεριφορά διάλυσης και διασποράς αποτελεί τον σημαντικότερο δείκτη in vitro σχετικά με τη συμπεριφορά αποδέσμευσης του φαρμάκου στον οργανισμό.
Η ΔΟΚΙΜΗ ΔΙΑΛΥΣΗΣ αποτελεί μία από τις πιο κρίσιμες μετρήσεις στον τομέα αυτό. Δεν αρκεί ένα δισκίο να περιέχει τη σωστή ποσότητα δραστικής ουσίας· η ουσία αυτή πρέπει να διαλύεται με τον κατάλληλο ρυθμό. Το προφίλ διάλυσης χρησιμοποιείται για την αξιολόγηση της επίδρασης αλλαγών στη σύνθεση επί της βιοδιαθεσιμότητας και κατέχει κεντρική θέση στην έγκριση κυκλοφορίας γενοσήμων φαρμάκων.
Η ΕΠΙΚΥΡΩΣΗ ΤΗΣ ΜΕΘΟΔΟΥ αποτελεί υποχρεωτικό βήμα σε αυτήν την κατηγορία. Εάν χρησιμοποιείται μέθοδος της φαρμακοποιίας, επιβεβαιώνεται ότι η μέθοδος λειτουργεί κατάλληλα υπό τις συνθήκες του συγκεκριμένου εργαστηρίου. Εάν έχει αναπτυχθεί δική της μέθοδος, επικυρώνεται με βάση παραμέτρους όπως η γραμμικότητα, η ακρίβεια, η ορθότητα, η επιλεκτικότητα, τα όρια ανίχνευσης και προσδιορισμού, καθώς και η σταθερότητα. Τα αποτελέσματα που προκύπτουν από μια μέθοδο που δεν έχει επικυρωθεί δεν μπορούν να χρησιμοποιηθούν στον φάκελο αδειοδότησης.
Οι δοκιμές σταθερότητας καθορίζουν τη διάρκεια ζωής του προϊόντος και αποτελούν τη μακρότερη διαδικασία στον τομέα αυτό. Το προϊόν διατηρείται υπό καθορισμένες συνθήκες θερμοκρασίας και υγρασίας, αναλύεται σε τακτά χρονικά διαστήματα και τα αποτελέσματα αποτελούν τη βάση για δηλώσεις διάρκειας ζωής και συνθηκών αποθήκευσης. Οι επιταχυνόμενες συνθήκες παρέχουν προκαταρκτικές πληροφορίες, αλλά τα δεδομένα σε πραγματικό χρόνο είναι τα βασικά.
Ο μικροβιολογικός τομέας αποτελεί ξεχωριστό κλάδο: καταμέτρηση μικροβιακού φορτίου, αναζήτηση καθορισμένων μικροοργανισμών, δοκιμή αποστείρωσης σε αποστειρωμένα προϊόντα και δοκιμή βακτηριακών ενδοτοξινών. Στα αποστειρωμένα προϊόντα περιλαμβάνονται επίσης ο έλεγχος ακεραιότητας της συσκευασίας και η επικύρωση αποστείρωσης.
Η ακεραιότητα δεδομένων έχει μετακινηθεί στο επίκεντρο των επιθεωρήσεων τα τελευταία χρόνια. Δεν αρκεί το αποτέλεσμα να είναι σωστό· τα ακατέργαστα δεδομένα πρέπει να είναι ιχνηλάσιμα, αμετάβλητα και ελέγξιμα. Η επικύρωση ηλεκτρονικών συστημάτων καταγραφής έχει επομένως γίνει αναπόσπαστο μέρος της ανάλυσης.
Ομάδες μεθόδων σε αυτόν τον τομέα
Ταυτότητα και προσδιορισμός
HPLC, UPLC, φασματοφωτομετρία UV-Vis, τιτλοδότηση, επιβεβαίωση ταυτότητας με FTIR.
Προσμείξεις και υπολείμματα
Σχετικές προσμείξεις, προϊόντα αποδόμησης, υπολειμματικοί διαλύτες (GC-headspace), έλεγχος νιτροζαμινών.
Στοιχειακές προσμείξεις
Προσδιορισμός στοιχειακών προσμείξεων με ICP-MS και ICP-OES και σχετική αξιολόγηση κινδύνου.
Φυσικοχημικό
Διάλυση και αποσάθρωση, σκληρότητα, τριπτότητα, ομοιομορφία δοσολογικών μονάδων, περιεκτικότητα νερού (Karl Fischer), μέγεθος σωματιδίων.
Μικροβιολογικό
Μικροβιακή καταμέτρηση, καθορισμένοι μικροοργανισμοί, αποστείρωση, βακτηριακή ενδοτοξίνη, αποτελεσματικότητα συντηρητικού.
Σταθερότητα
Μελέτες σταθερότητας πραγματικού χρόνου και επιταχυνόμενης· φωτοσταθερότητα και σταθερότητα κατά τη χρήση.
Συχνές συγχύσεις σε αυτόν τον τομέα
- Η φαρμακοποιική μέθοδος είναι δεσμευτική· μια εναλλακτική μέθοδος μπορεί να χρησιμοποιηθεί μόνο αποδεικνύοντας την ισοδυναμία της.
- Ένα αποτέλεσμα που παράγεται χωρίς επικύρωση μεθόδου δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε φάκελο άδειας κυκλοφορίας.
- Η επιταχυνόμενη σταθερότητα δεν αντικαθιστά τα δεδομένα πραγματικού χρόνου· η διάρκεια ζωής υποστηρίζεται από αποτελέσματα πραγματικού χρόνου.
- Το προφίλ διάλυσης είναι ευαίσθητο στον τύπο συσκευής, τον ρυθμό ανάδευσης και το μέσο· οι συνθήκες πρέπει να είναι πλήρεις στην έκθεση.
- Μια ανεπάρκεια στην ακεραιότητα δεδομένων παράγει μη συμμόρφωση σε επιθεώρηση ακόμη κι αν το αποτέλεσμα είναι σωστό.
- Μια αλλαγή σύνθεσης ή προμηθευτή απαιτεί αναλυτική σύγκριση και, όπου χρειάζεται, νέα μελέτη σταθερότητας.
Ποιες αποφάσεις υποστηρίζουν αυτά τα αποτελέσματα
- Ο φάκελος άδειας κυκλοφορίας και η απελευθέρωση παρτίδας
- Καθορισμός διάρκειας ζωής και συνθηκών αποθήκευσης
- Μεταφορά μεθόδου και επικύρωση μεθόδου
- Έλεγχος αποδοχής εισερχόμενων πρώτων υλών από προμηθευτές
- Αξιολόγηση της επίδρασης αλλαγής σύνθεσης στη βιοϊσοδυναμία
Σχετικά τεστ
Συχνές ερωτήσεις για τη Assay
Το αποτέλεσμα της ανάλυσης πέρασε — είναι το προϊόν συμβατό;
Όχι από μόνο του. Η ανάλυση δίνει το μέσο περιεχόμενο. Η ομοιομορφία περιεχομένου απαιτείται ξεχωριστά για τη διανομή από μονάδα σε μονάδα και η δοκιμή διάλυσης για την πρόβλεψη της βιοδιαθεσιμότητας.