Qu'est-ce que UV-VIS — analyse ?
Un spectrophotomètre UV-VIS mesure la quantité de lumière absorbée par une solution dans les régions ultraviolette et visible. L'absorbance est directement proportionnelle à la concentration, selon la relation Beer-Lambert.
Objectif de UV-VIS — analyse
L’objectif est de déterminer rapidement et à faible coût la concentration de composés absorbant la lumière. En combinaison avec des réactifs chromogènes, les substances qui ne s'absorbent pas d'elles-mêmes deviennent également mesurables.
À quels produits UV-VIS — analyse s'applique-t-il ?
- Paramètres tels que les nitrates, les phosphates et la DCO dans les eaux potables et usées
- Dosage des principes actifs dans les produits pharmaceutiques
- Mesure de la couleur et des additifs dans les aliments et les boissons
- Concentration du filtre UV dans les cosmétiques
- Mesures de concentration en enzymes et protéines
Dans quels secteurs UV-VIS — analyse est-il utilisé ?
Normes relatives à UV-VIS — analyse
- Pharmacopée européenne 2.2.25 (spectrophotométrie d'absorption)
- ISO 7887 (qualité de l'eau — détermination de la couleur)
- ISO 6060 / ISO 15705 (demande chimique en oxygène)
Conditions de UV-VIS — analyse
- Dalga boyu
- Absorption maximale de l'analyte ; défini dans la méthode
- Baignoire
- Quartz dans la région UV, verre ou plastique dans la région visible
- plage linéaire
- Elle est étudiée dans le domaine d'absorbance où Lambert-Beer est valable.
- Aveugle
- La mise à zéro se fait avec un solvant ou un blanc réactif
Équipement pour UV-VIS — analyse
- Spectrophotomètre UV-VIS
- Cuves en quartz et en verre
- Changeur de cuvette automatique
- Porte-cuvette à température contrôlée (pour les mesures cinétiques)
Exigences d'échantillon pour UV-VIS — analyse
- L'échantillon doit être une solution claire ; la turbidité fausse le résultat
- Une filtration ou une centrifugation est appliquée si nécessaire
- Dilué si la concentration est supérieure à la plage linéaire
- Quelques millilitres d’échantillon suffisent généralement
Durée de UV-VIS — analyse
Une seule mesure prend quelques secondes. La préparation des échantillons et les temps d'attente des réactions chromogènes déterminent la durée totale.
Procédure de UV-VIS — analyse
- 1L'échantillon est dissous, filtré si nécessaire et dilué.
- 2Un réactif chromogène, le cas échéant, est ajouté et le temps d'attente défini est respecté.
- 3L'instrument est mis à zéro avec la solution à blanc.
- 4L'absorbance des solutions d'étalonnage est mesurée.
- 5L'absorbance de l'échantillon est lue.
- 6La concentration est calculée à partir de la courbe d'étalonnage.
Critères d'acceptation de UV-VIS — analyse
L'acceptabilité du résultat est déterminée par comparaison avec les valeurs de la monographie de la pharmacopée, les limites de rejet ou les spécifications du produit.
Évaluation des résultats
La mesure n'est valable que dans la plage où la relation Beer-Lambert est linéaire. L'écart commence à des valeurs d'absorbance élevées ; dans ce cas, un résultat pris sans dilution n'est pas fiable.
Rapport de UV-VIS — analyse
- Description de l'échantillon, date de réception et numéro de laboratoire
- Méthode appliquée et étalon de référence, le cas échéant
- Conditions d’instrument et de mesure
- Étapes de préparation des échantillons
- Résultats et unités de mesure
- Incertitude de mesure (si demandé)
- Une déclaration selon laquelle les résultats concernent uniquement l'échantillon soumis pour test
Accréditation
EUROLAB détient une accréditation internationalement reconnue obtenue auprès des organismes d'accréditation parties aux accords de reconnaissance multilatérale de l'IAF et de l'ILAC, selon ISO/IEC 17025 pour les tests en laboratoire, ISO/IEC 17020 pour l'inspection et la surveillance, et ISO/IEC 17021-1 et ISO/IEC 17065 pour la certification des systèmes et des produits. Cette chaîne garantit que les rapports et certificats délivrés sont acceptés dans le monde entier.
La possibilité de proposer ce test dans le cadre d'une accréditation dépend de votre produit et de la norme appliquée ; l'accréditation étant méthodologique, le périmètre est confirmé par écrit au stade du devis.
Portée et autorisationsRèglements connexes
- Règlement sur le contrôle de la pollution de l’eau
- Règlement sur l'eau destinée à la consommation humaine
- Monographies de la Pharmacopée Européenne
Pages où cette méthode est utilisée
Méthodes d'analyse — Que fait ce groupe de méthodes ?
La section ci-dessous décrit le domaine auquel appartient l'essai UV-VIS — analyse ; les conditions et critères d'acceptation de cet essai figurent dans les sections ci-dessus. Le périmètre propre à votre produit est confirmé par écrit au stade du devis.
Les pages sur les méthodes analytiques sont des pages consacrées à une TECHNIQUE DE MESURE plutôt qu'à un essai. Cette différence compte : « l'essai au brouillard salin » est un essai et répond à une question ; « ICP-MS » est une technique et s'utilise dans des dizaines d'essais différents. Parfois, l'utilisateur ne recherche pas l'essai mais la technique — car c'est le nom de la méthode qui figure dans son cahier des charges.
Cette distinction devient déterminante dans le choix d'un laboratoire. Lorsqu'un client demande une « analyse des métaux lourds », la vraie question est de savoir par quelle technique elle sera réalisée : la XRF est rapide et non destructive mais ne distingue pas les composés ; l'AAS est économique pour un seul élément ; l'ICP-OES analyse plusieurs éléments ; l'ICP-MS détecte des niveaux de trace. Le même échantillon donne des résultats avec des limites de détection et des incertitudes différentes selon les quatre techniques.
Le choix de la méthode se fait selon trois critères. LIMITE DE DÉTECTION : la concentration recherchée est-elle dans la plage que la méthode peut détecter ? COMPATIBILITÉ DE MATRICE : la matrice de l'échantillon (plastique, aliment, sol, métal) est-elle une que la méthode peut traiter, et un prétraitement est-il nécessaire ? LIEN AVEC LE CAHIER DES CHARGES : la norme produit ou la législation impose-t-elle une méthode particulière ? Le troisième critère l'emporte souvent sur les deux premiers — le cahier des charges impose la méthode.
Les pages de méthodes construisent une CHAÎNE. Une technique est liée aux pages de test sur lesquelles elle est utilisée, aux normes sur lesquelles reposent ces tests, à la législation à laquelle ces normes sont liées et, en fin de compte, aux régimes d'accès au marché. La chaîne d'exemples dans le document source fonctionne comme ceci : XRF → analyse des métaux → conformité RoHS → restriction sur les métaux lourds → pages de revêtement. Quel que soit le lien à partir duquel l’utilisateur entre, il atteint les autres.
La préparation des échantillons est la moitié invisible du résultat dans cette famille et constitue une source d’erreur plus importante que la technique elle-même. La méthode de digestion, le degré de broyage, le solvant d'extraction et le taux de dilution modifient considérablement le résultat. Le même échantillon sur le même instrument donne un résultat différent avec une préparation différente ; la définition de la méthode couvre donc également la préparation.
L'étalonnage et la vérification sont le troisième élément déterminant. Un instrument est calibré avec un matériau de référence certifié, la courbe d'étalonnage est vérifiée périodiquement et un échantillon de contrôle est analysé dans chaque lot. Sans ces étapes, un numéro produit n'est pas traçable même si l'instrument fonctionne correctement.
Groupes de méthodes dans ce domaine
Analyse élémentaire
ICP-OES, ICP-MS, AAS et XRF. Ils diffèrent par la limite de détection, la tolérance matricielle et la capacité multi-éléments.
Chromatographie
GC, GC-MS, HPLC, LC-MS/MS et chromatographie ionique. Il sépare un mélange en ses composants et mesure chacun séparément.
Spectroscopie
FTIR, Raman, UV-Vis et émission optique. Pour l’identité des matériaux, l’identification des groupes fonctionnels et la composition de l’alliage.
Analyse thermique
DSC, TGA, DMA et dilatométrie. Températures de transition, composition, décomposition et comportement dimensionnel.
Microscopie et imagerie
Microscopie optique, SEM-EDS, radiographie et tomographie. Structure, défauts et distribution élémentaire.
Chimie classique (par voie humide)
Titrage, gravimétrie et colorimétrie. Utilisé comme méthode de référence et pour confirmer les résultats instrumentaux.
Confusions fréquentes dans ce domaine
- XRF est un outil de dépistage ; il voit les éléments et ne distingue pas les composés. Une décision concernant un composé restreint nécessite une confirmation par chimie humide.
- L'expression « non détecté » n'est pas une preuve d'absence ; elle se lit avec la limite de détection de la méthode.
- La spécification lie la méthode. Une méthode techniquement meilleure n’est pas acceptée si la spécification en appelle une autre.
- La préparation des échantillons fait partie du résultat ; un rapport qui ne mentionne pas la préparation n'est pas reproductible.
- Les résultats obtenus par différentes techniques ne peuvent pas être comparés directement ; leurs limites de détection et leurs incertitudes diffèrent.
- Une page de méthode n’est pas une page de test ; quelle méthode s'applique à quel test provient de la norme de produit.
Quelles décisions ces résultats étayent
- Faire correspondre la méthode du cahier des charges au périmètre du laboratoire
- Choix de la méthode selon la limite de détection et la compatibilité matricielle
- Confirmation d'un résultat instrumental par une méthode de référence
- Élimination des écarts liés à la préparation des échantillons
Tests associés
Questions fréquentes sur UV-VIS — analyse
Un échantillon trouble peut-il être mesuré ?
Non. La turbidité disperse la lumière, augmentant artificiellement l’absorbance. L'échantillon doit d'abord être filtré ou centrifugé.
Un seul composant peut-il être mesuré dans un mélange ?
Seulement si les autres composants n'absorbent pas à la même longueur d'onde. En cas d'interférence, une méthode chromatographique est requise.